گېن گۇرۇپپىسىدىكى MAMP تارقىتىلغان مۇداپىئە ئىنكاسىنىڭ كۈچلۈكلۈكى ۋە چىلاندىكى يوپۇرماق يوپۇرمىقىغا قارشى تۇرۇش كۈچىنىڭ گېن ئانالىزى

ئۆسۈملۈك ۋە كېسەللىك پەيدا قىلغۇچى ماتېرىياللار

چىلاننى ئايلاندۇرۇش نوپۇسى (SCP) دەپ ئاتىلىدىغان چىلان جەمئىيىتى خەرىتىسىنى ئىللىنوئىس ئۇنۋېرسىتىتى (ھازىرقى UC داۋىس) دىكى دوكتور پات بروۋېن تەمىنلىگەن.ئۇ ئىلگىرى تەسۋىرلەنگەن بولۇپ ، فوتوئاپپارات سەزگۈرلۈكىگە ۋە كىچىكرەك بويىغا ئۆزگەرتىلگەن كۆپ خىل سىزىقلار توپلىمى بولۇپ ، ئۆسۈملۈكلەرنىڭ ئامېرىكا مۇھىتىدىكى ئۆسۈشى ۋە تەرەققىياتىغا قۇلايلىق يارىتىدۇ.بۇ تەتقىقاتتا بۇ نوپۇستىن 510 قۇر ئىشلىتىلگەن ، گەرچە بىخلىنىش ۋە باشقا سۈپەت كونترول قىلىش مەسىلىسى سەۋەبىدىن ، ئۈچ قۇرنىڭ ھەممىسىنى تەھلىل قىلىشتا بارلىق قۇرلار ئىشلىتىلمىگەن.ئاخىرىدا 345 قۇردىكى سانلىق مەلۇماتلار چىتىن ئىنكاسىنى ئانالىز قىلىشقا ، flg22 ئىنكاسى ئۈچۈن 472 قۇر ، TLS قارشىلىق كۆرسىتىش ئۈچۈن 456 قۇر ئىشلىتىلگەن.B. كۇكەيجىددىي LSLP18 ئاركانزاس ئۇنۋېرسىتىتىدىكى دوكتور بۇرت بىلۇخمدىن ئېلىنغان.

MAMP ئىنكاس ئۆلچەش

بۇ تەتقىقاتتا ئوخشىمىغان ئىككى MAMP flg22 ، (Genscript مۇندەرىجىسى # RP19986) ۋە چىتىن ئىشلىتىلگەن.چىلان ئۆسۈملۈكلىرى پارنىكتىكى تۇپراق (% 33 قۇياش نۇرى Redi-Earth Pro ئۆسۈش ئارىلاشمىسى) بىلەن تولغان ئۆيلەرگە قويۇلغان قىستۇرمىلاردا ئۆستۈرۈلدى.ئەۋرىشكە يىغىشتىن بىر كۈن بۇرۇن ئۆسۈملۈكلەر سۇغاردى ، يىغىۋېلىنغان كۈنى ئارتۇق يوپۇرماق نەملىكىدىن ساقلاندى.

بۇ سىزىقلار ئىختىيارىي بولۇپ ، ئارقا سەپ سەۋەبىدىن ، 60 قۇر تۈركۈمگە تىكىلدى.ھەر بىر قۇرغا ئۈچ قۇر «ئىككى قازان» تىكىلدى.كېيىنكى تۈركۈملەر ئالدىنقى تۈركۈمدە پىششىقلاپ ئىشلىنىپ ، پۈتكۈل نوپۇس باھالانغۇچە تېرىلدى.ھەر ئىككى MAMP ئۈچۈن ئىككى تەجرىبە يۈگۈرۈش ئېلىپ بېرىلدى ، ئىككى خىل يۈگۈرۈشنىڭ ھەر بىرىدە گېن تىپى قايتا ئىختىيارىيلاشتۇرۇلدى.

ROS تەكشۈرۈشى ئىلگىرى تەسۋىرلەنگەندەك ئېلىپ بېرىلدى.قىسقىچە قىلىپ ئېيتقاندا ، ھەر بىر قۇر ئۈچۈن ئالتە خىل ئۇرۇق 3 ئوخشىمىغان قازانغا تىكىلدى.ھاسىل بولغان مايسىلاردىن ئۈچى بىردەكلىككە ئاساسەن تاللانغان.ئادەتتىن تاشقىرى كۆرۈنىدىغان ياكى كۆرۈنەرلىك ئېگىز ياكى قىسقا بولغان مايسىلار ئىشلىتىلمىدى.دىئامېتىرى 3 مىللىمېتىر كېلىدىغان تۆت يوپۇرماق دىسكىسى ئوخشىمىغان 15 كۈنلۈك چىلان ئۆسۈملۈكلىرىنىڭ 4-يوپۇرمىقىنىڭ ئەڭ كەڭ يېرىدىن قېزىۋېلىندى.ئىككى ئۆسۈملۈكتىن بىر تال دىسكا ، بىر ئۆسۈملۈكتىن ئىككى دىسكا ، ئىككىنچى دىسكا سۇ كونتروللۇقىغا ئايلىنىدۇ (تۆۋەندىكىلەرگە قاراڭ).دىسكا ئايرىم-ئايرىم ھالدا 50 µl H20 قارا رەڭلىك 96 قۇدۇق تاختىسىدا لەيلەپ ، يورۇقلۇقنىڭ ئالدىنى ئېلىش ئۈچۈن ئاليۇمىن تامغا بىلەن پېچەتلەنگەن ۋە بىر كېچە ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا ساقلانغان.ئەتىسى ئەتىگەندە L-012 (Wako ، كاتالوگ # 120-04891) ، 2 مىللىگىرام 100 mg / ml Chitin ياكى Flg22 نىڭ 2 μM.بۇ رېئاكسىيە ھەل قىلىش چارىسىنىڭ 50 µl تۆت قۇدۇقنىڭ ئۈچىگە قوشۇلدى.تۆتىنچى قۇدۇق مەسخىرە كونتروللۇقى بولۇپ ، ئۇنىڭغا MAMP نى ئۆز ئىچىگە ئالمىغان ئىنكاس ھەل قىلىش چارىسى قوشۇلدى.ھەر بىر تەخسىگە پەقەت سۇ بولغان تۆت قۇرۇق قۇدۇقمۇ كىرگۈزۈلدى.

رېئاكسىيە ھەل قىلىش چارىسىنى قوشقاندىن كېيىن ، يورۇقلۇق دەرىجىسى SynergyTM 2 كۆپ پەرقلەندۈرۈش مىكرو تىپلىق ئوقۇرمەن (BioTek) ئارقىلىق ھەر 2 مىنۇتتا بىر سائەتتە ئۆلچەنگەن.تەخسە ئوقۇغۇچ بۇ 1 سائەتتە ھەر 2 مىنۇتتا يورۇقلۇق دەرىجىسىنى ئۆلچەيدۇ.ھەر 31 قۇدۇقنىڭ يىغىندىسى ھەر بىر قۇدۇققا قىممەت بېرىش ئۈچۈن ھېسابلىنىدۇ.ھەر بىر گېن تىپىدىكى MAMP ئىنكاسىنىڭ مۆلچەر قىممىتى (ئۈچ تەجرىبە قۇدۇقنىڭ ئوتتۇرىچە يورۇقلۇق قىممىتى - تەقلىدى قۇدۇقنىڭ قىممىتى) - ئوتتۇرىچە قۇرۇق قۇدۇق قىممىتى ھېسابلىنىدۇ.قۇرۇق قۇدۇق قىممىتى ئىزچىل نۆلگە يېقىنلاشتى.

يوپۇرماق دېسكىسىNicotiana benthamiana، بىر يۇقىرى ئىنكاسچان چىلان سىزىقى (SC0003) ، بىر تۆۋەن ئىنكاسچان چىلان سىزىقى (PI 6069) مۇ سۈپەت كونترول قىلىش مەقسىتىدە ھەر 96 قۇدۇق تەخسىسىنىڭ كونتروللۇقىغا كىرگۈزۈلدى.

B. كۇكەيئوكۇل سېلىش ۋە ئوكۇل ئۇرۇش

B. كۇكەيinoculum ئىلگىرى تەسۋىرلەنگەندەك تەييارلانغان.قىسقىچە قىلىپ ئېيتقاندا ، چىلان دانچىلىرى سۇغا ئۈچ كۈن چىلاپ ، چايقىلىپ ، 1L لىق كونسېرۋا پلاستىنكىسىغا ئېلىنىپ ، 15psi ۋە 121 سېلسىيە گرادۇسلۇق ھاۋارايىدا بىر سائەت ئاپتوماتىك ئورىلىدۇ.بۇغدايلار يېڭى مەدەنىيەتتىن تەخمىنەن 5 مىللىلىتىرلىق مېكسىكا بىلەن ئوكۇل قىلىندىB. كۇكەيLSLP18 ئايرىپ ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا 2 ھەپتە ئايرىلدى ، ھەر 3 كۈندە بىر قېتىم چاقماق لەرزىگە كەلدى.2 ھەپتىدىن كېيىن ، زەمبۇرۇغ ئۇرۇقىدىن چىلان دانچىلىرى ھاۋادا قۇرۇتۇلدى ، ئاندىن 4 سېلسىيە گرادۇستا ئېتىز ئوكۇل قىلىنغۇچە ساقلاندى.ئوخشاش سىناق پۈتۈن سىناقتا ئىشلىتىلگەن بولۇپ ، ھەر يىلى يېڭى ياسالغان.ئوكۇل ئۇرۇش ئۈچۈن ، 4-10 ھەپتىلىك چىلان ئۆسۈملۈكلىرىنىڭ پاھىشىخانىسىغا 6-10 تال يۇقۇملانغان دان قويۇلدى.بۇ زەمبۇرۇغلاردىن ھاسىل بولغان سپورا بىر ھەپتە ئىچىدە ياش چىلان ئۆسۈملۈكلىرىدە يۇقۇملىنىشنى قوزغىدى.

ئۇرۇق تەييارلاش

ئېتىزغا تېرىشتىن ئىلگىرى چىلان ئۇرۇقى زەمبۇرۇغ يوقىتىش دورىسى ، ھاشارات يوقىتىش دورىسى ۋە بىخەتەر ئارىلاشما ماددىلار بىلەن بىر تەرەپ قىلىنغان بولۇپ ، تەركىبىدە ~ 1% Spirato 480 FS زەمبۇرۇغ يوقىتىش دورىسى ،% 4 Sebring 480 FS زەمبۇرۇغ يوقىتىش دورىسى ،% 3 Sorpro 940 ES ئۇرۇقى بىخەتەر.ئاندىن بۇ ئۇرۇقنى 3 كۈن ھاۋادا قۇرۇتتى ، بۇ ئۇرۇقنى ئۇرۇقنىڭ ئەتراپىغا نېپىز سىر بىلەن تەمىنلىدى.بىخەتەر دورا ئۆسۈملۈك دورىسى قوش ماگنۇمنى پەيدا بولۇشتىن بۇرۇنقى داۋالاش ئۇسۇلى سۈپىتىدە ئىشلىتىشكە يول قويدى.

نىشانلىق يوپۇرماق داغغا چىدامچانلىقىنى باھالاش

SCP 2017-يىلى 6-ئاينىڭ 14-كۈنىدىن 15-كۈنىگىچە ۋە 2018-يىلى 6-ئاينىڭ 20-كۈنى NC نىڭ كلايتوندىكى مەركىزى زىرائەت تەتقىقات پونكىتىغا تىكىلگەن بولۇپ ، ھەر بىر ئەھۋالدا ئىككى تەجرىبە كۆپەيتىلگەن.ھەر مو يەرگە 10 دانە ئۇرۇق ئىشلىتىپ ، كەڭلىكى 0.9 مېتىر بولۇپ ، 1.8 مېتىر يەككە قۇرغا تەجرىبە تېرىلدى.قىرغاق تەسىرىنىڭ ئالدىنى ئېلىش ئۈچۈن ھەر قېتىملىق سىناقنىڭ ئەتراپىغا ئىككى چېگرا قۇر تىكىلدى.بۇ تەجرىبە 2017-يىلى 7-ئاينىڭ 20-كۈنى ۋە 2018-يىلى 7-ئاينىڭ 20-كۈنى ئوكۇل قىلىنغان بولۇپ ، بۇ ۋاقىتتا چىلان ئۆسۈملۈكلىرى ئۆسۈش باسقۇچىدا تۇراتتى. ئۆلۈك ئۆسۈملۈكلەر بىر نومۇرغا ئېرىشتى.ھەر يىلى ئوكۇل قىلىنىپ ئىككى ھەپتىدىن باشلاپ 2017-يىلى ئىككى قېتىم ، 2018-يىلى تۆت قېتىم ئوقۇلدى.SAUDPC (كېسەللىكنىڭ ئىلگىرىلەش ئەگرى سىزىقىدىكى قېلىپلاشقان رايون) ئىلگىرى تەسۋىرلەنگەندەك ھېسابلىنىدۇ.