سودا سىپېرمېترىن دورىلىرىنىڭ كىچىك سۇ ئىتلىرىغا بولغان ئۆلۈش نىسبىتى ۋە زەھەرلىكلىكى

بۇ تەتقىقات سودا خاراكتېرلىك دورىلارنىڭ ئۆلۈم نىسبىتى، ئۆلۈم نىسبىتى ۋە زەھەرلىكلىكىنى باھالىدى.سىپېرمېترىنئانۇران ئىت قۇرتلىرىغا فورمۇلا. ئۆتكۈر سىناقتا، 100–800 μg/L قويۇقلۇقى 96 سائەت سىناق قىلىندى. ئۇزۇن مۇددەتلىك سىناقتا، تەبىئىي ھالدا پەيدا بولغان سىپېرمېترىن قويۇقلۇقى (1، 3، 6 ۋە 20 μg/L) ئۆلۈش نىسبىتى سىناق قىلىندى، ئاندىن مىكرو يادرو سىنىقى ۋە قىزىل قان ھۈجەيرىسى يادرو نورمالسىزلىقى 7 كۈن سىناق قىلىندى. سودا سىپېرمېترىن فورمۇلىسىنىڭ ئىت قۇرتلىرىغا LC50 قىممىتى 273.41 μg L−1 بولدى. ئۇزۇن مۇددەتلىك سىناقتا، ئەڭ يۇقىرى قويۇقلۇق (20 μg L−1) سىناق قىلىنغان ئىت قۇرتلىرىنىڭ يېرىمىنى ئۆلتۈرگەنلىكى ئۈچۈن، ئۆلۈش نىسبىتى %50 تىن يۇقىرى بولدى. مىكرو يادرو سىنىقى 6 ۋە 20 μg L−1 دە كۆرۈنەرلىك نەتىجىلەرنى كۆرسەتتى ۋە بىر قانچە يادرو نورمالسىزلىقى بايقالدى، بۇ سودا سىپېرمېترىن فورمۇلىسىنىڭ P. gracilis غا قارشى زەھەرلىك پوتېنسىيالغا ئىگە ئىكەنلىكىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ. سىپېرمېترىن بۇ تۈر ئۈچۈن يۇقىرى خەۋپكە ئىگە، بۇ ئۇنىڭ قىسقا ۋە ئۇزۇن مۇددەتلىك كۆپ خىل مەسىلىلەرنى كەلتۈرۈپ چىقىرىشى ۋە بۇ ئېكولوگىيە سىستېمىسىنىڭ دىنامىكىسىغا تەسىر كۆرسىتىشى مۇمكىنلىكىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ. شۇڭا، سودا سىپېرمېترىن فورمۇلالىرىنىڭ P. gracilis غا زەھەرلىك تەسىرى بار دەپ خۇلاسە چىقىرىشقا بولىدۇ.
دېھقانچىلىق پائالىيەتلىرىنىڭ ئۈزلۈكسىز كېڭىيىشى ۋە كۈچلۈك قوللىنىلىشى سەۋەبىدىنزىيانداش ھاشاراتلارنى يوقىتىشتەدبىرلەرگە ئاساسلانغاندا، سۇ ھايۋانلىرى دائىم پېستىتسىدلارغا ئۇچرايدۇ1،2. دېھقانچىلىق مەيدانلىرىغا يېقىن سۇ بايلىقىنىڭ بۇلغىنىشى قوش ھايۋانلار قاتارلىق نىشانسىز ئورگانىزملارنىڭ تەرەققىياتى ۋە ياشىشىغا تەسىر كۆرسىتىشى مۇمكىن.
قوش قۇملۇقلار مۇھىت ماترىتسىسىنى باھالاشتا بارغانسېرى مۇھىم ئورۇندا تۇرماقتا. ئانۇرانلار مۇرەككەپ ھايات دەۋرىيلىكى، تېز لىچىنكا ئۆسۈش سۈرئىتى، تروفىك ھالىتى، سۇ ئۆتكۈزۈشچانلىقى10،11، كۆپىيىشتە سۇغا تايىنىش12 ۋە قوغدىنىشسىز تۇخۇم11،13،14 قاتارلىق ئۆزگىچە ئالاھىدىلىكلىرى سەۋەبىدىن مۇھىت بۇلغىنىشىنىڭ ياخشى بىئوئىندىكتورى دەپ قارىلىدۇ. كىچىك سۇ پاقىسى (Physalaemus gracilis)، ئادەتتە يىغلاۋاتقان پاقا دەپ ئاتىلىدۇ، پېستىتسىد بۇلغىنىشىنىڭ بىئوئىندىكتورى تۈرى ئىكەنلىكى ئىسپاتلاندى4،5،6،7،15. بۇ تۈر ئارگېنتىنا، ئۇرۇگۋاي، پاراگۋاي ۋە بىرازىلىيەدىكى سۇلاردا، قوغدىلىدىغان رايونلاردا ياكى ئوخشىمىغان ياشاش مۇھىتى بار رايونلاردا ئۇچرايدۇ1617 ۋە كەڭ تارقالغانلىقى ۋە ھەر خىل ياشاش مۇھىتىغا بەرداشلىق بېرىشى سەۋەبىدىن IUCN تۈرگە ئايرىش سىستېمىسى تەرىپىدىن مۇقىم دەپ قارىلىدۇ18.
سىمپېرمېتىرىنغا ئۇچرىغاندىن كېيىن، قوش قۇشلاردا ئۆلۈمگە ئېلىپ بارىدىغان تەسىرلەر بايقالغان، بۇنىڭ ئىچىدە ئىت بالىقىنىڭ خۇلق-ئاتۋار، مورفولوگىيىلىك ۋە بىئوخىمىيىلىك ئۆزگىرىشلىرى23،24،25، ئۆلۈش ۋە ئۆزگىرىش ۋاقتىنىڭ ئۆزگىرىشى، ئېنزىم ئۆزگىرىشلىرى، تۇخۇمدىن چىقىش مۇۋەپپەقىيىتىنىڭ تۆۋەنلىشى24،25، ھەددىدىن زىيادە ئاكتىپلىق26، خولىنېستېرازا پائالىيىتىنىڭ چەكلىنىشى27 ۋە سۇ ئۈزۈش ئىقتىدارىنىڭ ئۆزگىرىشى7،28 قاتارلىقلار بار. قانداقلا بولمىسۇن، قوش قۇشلاردا سىمپېرمېتىرىننىڭ گېنوتوكسىك تەسىرى توغرىسىدىكى تەتقىقاتلار چەكلىك. شۇڭا، ئانۇران تۈرلىرىنىڭ سىمپېرمېتىرىنغا بولغان سەزگۈرلۈكىنى باھالاش مۇھىم.
مۇھىت بۇلغىنىشى قوش قۇملۇق ھايۋانلارنىڭ نورمال ئۆسۈشى ۋە تەرەققىياتىغا تەسىر كۆرسىتىدۇ، ئەمما ئەڭ ئېغىر سەلبىي تەسىرى پېستىتسىد تەسىرىدىن كېلىپ چىققان DNA نىڭ گېنىغا زىيان يەتكۈزۈشتۇر13. قان ھۈجەيرىسى مورفولوگىيەسى ئانالىزى بۇلغىنىشنىڭ مۇھىم بىئوئىندىكاتورى ۋە ماددىنىڭ ياۋا تۈرلەرگە بولغان زەھەرلىكلىكى29. مىكرو يادرو سىنىقى مۇھىتتىكى خىمىيىلىك ماددىلارنىڭ گېن زەھەرلىكلىكىنى بېكىتىشتە ئەڭ كۆپ ئىشلىتىلىدىغان ئۇسۇللارنىڭ بىرى30. ئۇ قوش قۇملۇق ھايۋانلارغا ئوخشاش ئورگانىزملارنىڭ خىمىيىلىك بۇلغىنىشىنىڭ ياخشى كۆرسەتكۈچى بولغان تېز، ئۈنۈملۈك ۋە ئەرزان ئۇسۇل31،32 ھەمدە گېن زەھەرلىك بۇلغىمىلارغا ئۇچراش توغرىسىدا ئۇچۇر بېرەلەيدۇ33.
بۇ تەتقىقاتنىڭ مەقسىتى مىكرو يادرو سىنىقى ۋە ئېكولوگىيەلىك خەۋپنى باھالاش ئارقىلىق سودا سىپېرمېترىن فورمۇلاسىنىڭ كىچىك سۇ ئىتلىرىغا بولغان زەھەرلىك تەسىرىنى باھالاشتىن ئىبارەت.
سىناقنىڭ ئۆتكۈر مەزگىلىدە ھەر خىل قويۇقلۇقتىكى سودا سىپېرمېترىنغا ئۇچرىغان P. gracilis tagpoles نىڭ ئومۇمىي ئۆلۈش نىسبىتى (%).
ئۇزۇن مۇددەتلىك سىناق جەريانىدا سودا سىپېرمېترىننىڭ ھەر خىل قويۇقلۇقىغا ئۇچرىغان P. gracilis تىغباغلىرىنىڭ ئومۇمىي ئۆلۈش نىسبىتى (%).
كۆزىتىلگەن يۇقىرى ئۆلۈش نىسبىتى، ھەر خىل قويۇقلۇقتىكى سىپېرمېترىنغا (6 ۋە 20 μg/L) دۇچ كەلگەن قوش قۇملۇق ھايۋانلارنىڭ گېن زەھەرلىك تەسىرىنىڭ نەتىجىسى بولۇپ، بۇنى مىكرو يادرو (MN) ۋە قىزىل قان ھۈجەيرىلىرىدىكى يادرو نورمالسىزلىقلىرىنىڭ مەۋجۇتلۇقى ئىسپاتلايدۇ. MN نىڭ شەكىللىنىشى مىتوزدىكى خاتالىقلارنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ ھەمدە خروموسومالارنىڭ مىكرو تۇرۇبالارغا ناچار باغلىنىشى، خروموسومانىڭ سۈمۈرۈلۈشى ۋە توشۇشىغا مەسئۇل ئاقسىل بىرىكمىلىرىدىكى نۇقسانلار، خروموسوما ئايرىشتىكى خاتالىقلار ۋە DNA زەخمىلىنىشىنى رېمونت قىلىشتىكى خاتالىقلار بىلەن مۇناسىۋەتلىك 38،39 ھەمدە پېستىتسىد كەلتۈرۈپ چىقارغان ئوكسىدلىنىش سترېسى بىلەن مۇناسىۋەتلىك بولۇشى مۇمكىن 40،41. باھالانغان بارلىق قويۇقلۇقلاردا باشقا نورمالسىزلىقلار كۆزىتىلدى. سىپېرمېترىننىڭ قويۇقلۇقىنىڭ ئېشىشى قىزىل قان ھۈجەيرىلىرىدىكى يادرو نورمالسىزلىقىنى ئەڭ تۆۋەن (1 μg/L) ۋە ئەڭ يۇقىرى (20 μg/L) مىقداردا ئايرىم-ئايرىم ھالدا %5 ۋە %20 ئاشۇردى. مەسىلەن، بىر تۈرنىڭ DNA دىكى ئۆزگىرىشلەر قىسقا ۋە ئۇزۇن مۇددەتلىك ياشاشقا ئېغىر ئاقىۋەتلەرنى كەلتۈرۈپ چىقىرىپ، نوپۇسنىڭ ئازىيىشى، كۆپىيىش ئىقتىدارىنىڭ ئۆزگىرىشى، قانداشلىق، گېن كۆپ خىللىقىنىڭ يوقىلىشى ۋە كۆچۈش نىسبىتىنىڭ ئۆزگىرىشىگە سەۋەب بولىدۇ. بۇ ئامىللارنىڭ ھەممىسى تۈرلەرنىڭ ياشىشى ۋە ساقلىنىشىغا تەسىر كۆرسىتىدۇ 42،43. ئېرىتروئىد نورمالسىزلىقىنىڭ شەكىللىنىشى سىتوكىنېزنىڭ توسۇلۇشىنى كۆرسىتىپ، ھۈجەيرە بۆلۈنۈشىنىڭ نورمالسىزلىقىنى (ئىككى يادرولىق ئېرىتروسىتلار) كەلتۈرۈپ چىقىرىشى مۇمكىن44،45؛ كۆپ بۆلۈملۈك يادرولار يادرو پەردىسىنىڭ كۆپ بۆلۈملۈك چىقىپ تۇرغان قىسمى46، باشقا ئېرىتروئىد نورمالسىزلىقلىرى بولسا يادرو بۆرەكلىرى/پېللېبلار47 قاتارلىق DNA نىڭ كۈچىيىشى بىلەن مۇناسىۋەتلىك بولۇشى مۇمكىن. ئۆڭكۈرلۈك ئېرىتروسىتلارنىڭ بولۇشى، بولۇپمۇ بۇلغانغان سۇدا ئوكسىگېن توشۇشىنىڭ قالايمىقانلىشىشىنى كۆرسىتىپ بېرىشى مۇمكىن48،49. ئاپپتوز ھۈجەيرە ئۆلۈشىنى كۆرسىتىدۇ50.
باشقا تەتقىقاتلارمۇ سىپېرمېترىننىڭ گېنوتوكسىك تەسىرىنى كۆرسەتتى. كابانا قاتارلىقلار51 سىپېرمېترىننىڭ يۇقىرى قويۇقلۇقتىكى (5000 ۋە 10،000 μg L−1) غا 96 سائەت دۇچ كەلگەندىن كېيىن، Odontophrynus americanus ھۈجەيرىلىرىدە مىكرو يادرو ۋە يادرو ئۆزگىرىشلىرى، مەسىلەن قوش يادرولىق ھۈجەيرىلەر ۋە ئاپپتوز ھۈجەيرىلىرىنىڭ بارلىقىنى كۆرسەتتى. سىپېرمېترىن كەلتۈرۈپ چىقارغان ئاپپتوز P. biligonigerus52 ۋە Rhinella arenarum53 دىمۇ بايقالغان. بۇ نەتىجىلەر سىپېرمېترىننىڭ سۇ جانلىقلىرىغا گېنوتوكسىك تەسىرى بارلىقىنى ۋە MN ۋە ENA سىنىقىنىڭ سۇدا ياشايدىغان ھايۋانلارغا بولغان ئۆلۈمگە ئېلىپ بارىدىغان تەسىرىنىڭ كۆرسەتكۈچى بولۇشى مۇمكىنلىكىنى، شۇنداقلا زەھەرلىك ماددىلارغا دۇچ كەلگەن يەرلىك تۈرلەر ۋە ياۋا نوپۇسلارغا قوللىنىلىشى مۇمكىنلىكىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ12.
سىپېرمېترىننىڭ سودا فورمۇلاسى يۇقىرى مۇھىت خەۋپى (ئۆتكۈر ۋە سۈرۈنكىلىك) پەيدا قىلىدۇ، باش شىتابلارنىڭ سانى ئامېرىكا مۇھىت ئاسراش ئىدارىسى (EPA) نىڭ سەۋىيەسىدىن ئېشىپ كەتكەن54، بۇ مۇھىتتا مەۋجۇت بولسا، تۈرلەرگە سەلبىي تەسىر كۆرسىتىشى مۇمكىن. سۈرۈنكىلىك خەۋپنى باھالاشتا، ئۆلۈش نىسبىتى NOEC 3 μg L−1 بولۇپ، سۇدىكى قويۇقلۇقنىڭ تۈرلەرگە خەۋپ ئېلىپ كېلىشى مۇمكىنلىكىنى جەزملەشتۈرگەن55. ئېندوسۇلفان ۋە سىپېرمېترىن ئارىلاشمىسىغا ئۇچرىغان R. arenarum قۇرتلىرىنىڭ ئۆلۈم نىسبىتى 168 سائەتتىن كېيىن 500 μg L−1 بولغان؛ بۇ قىممەت 336 سائەتتىن كېيىن 0.0005 μg L−1 گە چۈشكەن. ئاپتورلار تەسىرگە ئۇچراش ۋاقتى قانچە ئۇزۇن بولسا، تۈرلەرگە زىيانلىق قويۇقلۇق شۇنچە تۆۋەن بولىدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ. شۇنىڭ بىلەن بىر ۋاقىتتا، NOEC قىممىتىنىڭ P. gracilis نىڭكىدىن يۇقىرى ئىكەنلىكىنى ئالاھىدە تەكىتلەش مۇھىم، بۇ تۈرلەرنىڭ سىپېرمېترىنغا بولغان ئىنكاسىنىڭ تۈرلەرگە خاس ئىكەنلىكىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ. ئۇنىڭدىن باشقا، ئۆلۈش نىسبىتى جەھەتتە، سىپېرمېترىنغا ئۇچرىغاندىن كېيىنكى P. gracilis نىڭ CHQ قىممىتى 64.67 گە يەتكەن، بۇ ئامېرىكا مۇھىت ئاسراش ئورگىنى تەرىپىدىن بېكىتىلگەن پايدىلىنىش قىممىتىدىن يۇقىرى54، ھەمدە R. arenarum قۇرتلىرىنىڭ CHQ قىممىتىمۇ بۇ قىممەتتىن يۇقىرى بولغان (336 سائەتتىن كېيىن CHQ > 388.00)، بۇ تەتقىق قىلىنغان ھاشارات دورىلىرىنىڭ بىر قانچە سۇ-قوڭغۇز تۈرىگە يۇقىرى خەۋپ ئېلىپ كېلىدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ. P. gracilis نىڭ ئۆزگىرىشىنى تاماملاش ئۈچۈن تەخمىنەن 30 كۈن ۋاقىت كېتىدىغانلىقىنى ئويلاشقاندا56، تەتقىق قىلىنغان سىپېرمېترىننىڭ قويۇقلۇقى يۇقۇملانغان شەخسلەرنىڭ بالدۇر ياشتا چوڭلار ياكى كۆپىيىش باسقۇچىغا كىرىشىنىڭ ئالدىنى ئېلىش ئارقىلىق نوپۇسنىڭ ئازىيىشىغا تۆھپە قوشۇشى مۇمكىن، دەپ خۇلاسە چىقىرىشقا بولىدۇ.
مىكرو يادرو ۋە باشقا ئېرىتروسىت يادرو نورمالسىزلىقلىرىنىڭ ھېسابلىغان خەۋپ-خەتەر باھالىشىدا، CHQ قىممىتى 14.92 دىن 97.00 گىچە بولغان، بۇ سىپېرمېتىرنىڭ P. gracilis نىڭ تەبىئىي ماكانىدىمۇ گېن زەھەرلىك خەۋپى بارلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ. ئۆلۈم نىسبىتىنى ئويلاشقاندا، P. gracilis غا بەرداشلىق بېرەلەيدىغان كسېنوبىئوتىك بىرىكمىلەرنىڭ ئەڭ يۇقىرى قويۇقلۇقى 4.24 μg L−1 بولغان. قانداقلا بولمىسۇن، 1 μg/L گىچە بولغان قويۇقلۇقلارمۇ گېن زەھەرلىك تەسىرىنى كۆرسەتكەن. بۇ پاكىت نورمالسىز شەخسلەرنىڭ سانىنىڭ ئېشىشىغا ۋە ئۇلارنىڭ ماكانىدىكى تۈرلەرنىڭ تەرەققىياتى ۋە كۆپىيىشىگە تەسىر كۆرسىتىپ، قوش ماكانلىق ھايۋانلار توپىنىڭ ئازىيىشىغا سەۋەب بولۇشى مۇمكىن.
سودا خاراكتېرلىك سىپېرمېترىن قۇرت-قۇمۇرسقا قارشى دورىسى P. gracilis غا يۇقىرى ئۆتكۈر ۋە ئۇزۇن مۇددەتلىك زەھەرلىك تەسىر كۆرسەتتى. مىكرو يادرو ۋە قىزىل قان ھۈجەيرىسى يادرو نورمالسىزلىقلىرىنىڭ، بولۇپمۇ چىشلىق يادرو، لوبىلىق يادرو ۋە كۆپۈكچە يادرولارنىڭ مەۋجۇتلۇقىدىن كۆرۈۋالغىلى بولىدۇكى، زەھەرلىك تەسىر سەۋەبىدىن ئۆلۈش نىسبىتى يۇقىرى بولدى. بۇنىڭدىن باشقا، تەتقىق قىلىنغان تۈرلەر ئۆتكۈر ۋە ئۇزۇن مۇددەتلىك مۇھىت خەۋپىنىڭ ئېشىپ كەتكەنلىكىنى كۆرسەتتى. بۇ سانلىق مەلۇماتلار، تەتقىقات گۇرۇپپىمىزنىڭ ئىلگىرىكى تەتقىقاتلىرى بىلەن بىرلەشتۈرۈلۈپ، سىپېرمېترىننىڭ ھەر خىل سودا خاراكتېرلىك فورمۇلالىرىنىڭمۇ ئاتسېتىلخولىنېستېرازا (AChE) ۋە بۇتىرىلخولىنېستېرازا (BChE) پائالىيىتىنىڭ تۆۋەنلىشى ۋە ئوكسىدلىنىش سترېسى58 نى كەلتۈرۈپ چىقىرىدىغانلىقىنى، شۇنداقلا P. gracilis دا سۇ ئۈزۈش پائالىيىتى ۋە ئېغىز بوشلۇقىنىڭ نورمالسىزلىقى59 نى كەلتۈرۈپ چىقىرىدىغانلىقىنى، بۇنىڭ بىلەن سىپېرمېترىننىڭ سودا خاراكتېرلىك فورمۇلاسىنىڭ بۇ تۈرگە نىسبەتەن يۇقىرى ئۆلۈمگە ئېلىپ بارىدىغان ۋە ئۆلۈمگە ئېلىپ بارىدىغان زەھەرلىك تەسىرگە ئىگە ئىكەنلىكىنى كۆرسەتتى. خارتمان قاتارلىقلار سىپېرمېترىننىڭ سودا خاراكتېرلىك فورمۇلاسىنىڭ توققۇز خىل باشقا پېستىتسىدقا سېلىشتۇرغاندا P. gracilis ۋە شۇ تۈردىكى باشقا بىر تۈر (P. cuvieri) ئۈچۈن ئەڭ زەھەرلىك ئىكەنلىكىنى بايقىدى. بۇ، مۇھىت ئاسراش ئۈچۈن قانۇنىي تەستىقلانغان سىپېرمېترىننىڭ قويۇقلۇقىنىڭ يۇقىرى ئۆلۈش نىسبىتى ۋە ئۇزۇن مۇددەتلىك نوپۇسنىڭ ئازىيىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىشى مۇمكىنلىكىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.
بۇ پېستىتسىدنىڭ قۇم-قۇمۇرسقا بولغان زەھەرلىكلىكىنى باھالاش ئۈچۈن تېخىمۇ كۆپ تەتقىقات ئېلىپ بېرىشقا توغرا كېلىدۇ، چۈنكى مۇھىتتا بايقالغان قويۇقلۇق يۇقىرى ئۆلۈش نىسبىتىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىشى ۋە P. gracilis غا خەۋپ يەتكۈزۈشى مۇمكىن. قۇم-قۇمۇرسقا تۈرىدىكى جانلىقلار توغرىسىدىكى سانلىق مەلۇماتلار، بولۇپمۇ بىرازىلىيە تۈرىدىكى جانلىقلار توغرىسىدىكى سانلىق مەلۇماتلار ئاز بولغاچقا، بۇ جانلىقلار توغرىسىدىكى تەتقىقاتلارنى ئىلگىرى سۈرۈش كېرەك.
ئۇزۇن مۇددەتلىك زەھەرلىكلىك سىنىقى 168 سائەت (7 كۈن) داۋاملاشتى، ئۆلۈشتىن تۆۋەن قويۇقلۇق: 1، 3، 6 ۋە 20 μg ai L−1 بولدى. ھەر ئىككى تەجرىبىدە، ھەر بىر داۋالاش گۇرۇپپىسىدىكى 10 دانە ئىت چۈچۈكبۈكى ئالتە قېتىم تەكرارلىنىپ باھالاندى، ھەر بىر قويۇقلۇقتا جەمئىي 60 دانە ئىت چۈچۈكبۈكى بار. بۇ ئارىلىقتا، پەقەت سۇ بىلەن بىر تەرەپ قىلىش سەلبىي كونترول رولىنى ئوينىدى. ھەر بىر تەجرىبە قۇرۇلمىسى 500 مىللىلىتىر سىغىمى ۋە ھەر 50 مىللىلىتىر ئېرىتمىدە 1 دانە ئىت چۈچۈكبۈكى زىچلىقىدىكى ستېرىل ئەينەك قاچىدىن تەركىب تاپقان. بۇغلىنىشنىڭ ئالدىنى ئېلىش ئۈچۈن، بوتۇلكا پولىئېتىلېن پەردە بىلەن يېپىلدى ۋە ئۈزلۈكسىز ھاۋا ئالماشتۇرۇلدى.
سۇ 0، 96 ۋە 168 سائەتتە پېستىتسىدنىڭ قويۇقلۇقىنى بېكىتىش ئۈچۈن خىمىيىلىك ئانالىز قىلىندى. سابىن قاتارلىقلار 68 ۋە مارتىنس قاتارلىقلار 69 نىڭ قارىشىچە، ئانالىزلار سانتا مارىيا فېدېراتسىيە ئۇنىۋېرسىتېتىنىڭ پېستىتسىد ئانالىز تەجرىبىخانىسىدا (LARP) ئۈچ قاتلىق تۆت قاتلىق ماسسا سپېكترومېتىرىيەسى (Varian مودېل 1200، پالو ئالتو، كالىفورنىيە، ئامېرىكا) ئارقىلىق ئېلىپ بېرىلدى. سۇدىكى پېستىتسىدلارنىڭ مىقدارىنى بېكىتىش قوشۇمچە ماتېرىيال سۈپىتىدە كۆرسىتىلدى (SM1-جەدۋەل).
مىكرو يادرو سىنىقى (MNT) ۋە قىزىل ھۈجەيرە يادرو نورمالسىزلىق سىنىقى (RNA) ئۈچۈن، ھەر بىر داۋالاش گۇرۇپپىسىدىكى 15 دانە ئىت چۈچۈكبۈكى ئانالىز قىلىندى. ئىت چۈچۈكبۈكى 5% لىدوكايىن (50 مىللىگرام g-170) بىلەن بېھۇش قىلىندى ۋە بىر قېتىملىق ئىشلىتىلىدىغان گېپارىن ئوكۇلى ئارقىلىق يۈرەك تېشىش ئۇسۇلى ئارقىلىق قان ئەۋرىشكىلىرى ئېلىندى. قان سۈرتكۈچلىرى مىكروسكوپ سىيرىلمىلىرىدا تەييارلىنىپ، ھاۋادا قۇرۇتۇلۇپ، 100% مېتانول (4 سېلسىيە گرادۇس) بىلەن 2 مىنۇت تۇرغۇزۇلۇپ، ئاندىن قاراڭغۇدا 15 مىنۇت 10% گىئېمسا ئېرىتمىسى بىلەن بوялدى. جەريان ئاخىرلاشقاندا، ئارتۇق داغنى چىقىرىۋېتىش ئۈچۈن سىيرىلمىلار دىستىللانغان سۇ بىلەن يۇيۇلۇپ، ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا قۇرۇتۇلدى.
ھەر بىر ئىت قۇرتىدىن كەم دېگەندە 1000 قىزىل قان ھۈجەيرىسى 71 نىشانلىق 100× مىكروسكوپ ئارقىلىق ئانالىز قىلىنىپ، MN ۋە ENA نىڭ بارلىقىنى ئېنىقلىدى. ئىت قۇرتىدىن جەمئىي 75796 قىزىل قان ھۈجەيرىسى سىپېرمېترىننىڭ قويۇقلۇقى ۋە كونترول گۇرۇپپىسىنى كۆزدە تۇتۇپ باھالاندى. گېن زەھەرلىكلىكى كارراسكو قاتارلىقلار ۋە فېنېچ قاتارلىقلارنىڭ ئۇسۇلىغا ئاساسەن تەھلىل قىلىندى.38،72 تۆۋەندىكى يادرو زەخمىلىنىشلىرىنىڭ چاستوتىسىنى بېكىتىش ئارقىلىق: (1) تۈگۈنچە ھۈجەيرىلەر: يادروسىز ھۈجەيرىلەر؛ (2) ئاپپتوز ھۈجەيرىلىرى: يادرو پارچىلىنىشى، پروگراممىلانغان ھۈجەيرە ئۆلۈمى؛ (3) ئىككى يادرولىق ھۈجەيرىلەر: ئىككى يادروسى بار ھۈجەيرىلەر؛ (4) يادرو غۇنچىسى ياكى قان ھۈجەيرىلىرى: يادرو پەردىسى كىچىك چىقىپ تۇرىدىغان، مىكرو يادروغا ئوخشاش قان ھۈجەيرىلىرى بار ھۈجەيرىلەر؛ (5) كارىئولىزلانغان ھۈجەيرىلەر: ئىچكى ماتېرىيالى يوق يادرونىڭ شەكلىگە ئىگە ھۈجەيرىلەر؛ (6) ئويمان ھۈجەيرىلەر: شەكلىدە روشەن يېرىق ياكى ئويمانلىق يادروسى بار ھۈجەيرىلەر، يەنى بۆرەك شەكىللىك يادرولار دەپمۇ ئاتىلىدۇ. (7) پارچە شەكىللىك ھۈجەيرىلەر: يۇقىرىدا تىلغا ئېلىنغان كۆپۈكچىلەردىن چوڭراق يادرو چىقىپ تۇرغان ھۈجەيرىلەر؛ ۋە (8) مىكرو ھۈجەيرىلەر: يادروسى قويۇقلاشقان ۋە سىتوپلازمىسى كىچىكلىگەن ھۈجەيرىلەر. ئۆزگىرىشلەر مەنپىي كونترول نەتىجىسى بىلەن سېلىشتۇرۇلدى.
ئۆتكۈر زەھەرلىكلىك سىنىقى نەتىجىلىرى (LC50) GBasic يۇمشاق دېتالى ۋە TSK-Trimmed Spearman-Karber ئۇسۇلى ئارقىلىق تەھلىل قىلىندى74. ئۇزۇن مۇددەتلىك سىناق سانلىق مەلۇماتلىرى خاتالىق نورماللىقى (Shapiro-Wilks) ۋە ئۆزگىرىشچانلىقنىڭ بىردەكلىكى (Bartlett) ئۈچۈن ئالدىن سىناق قىلىندى. نەتىجىلەر بىر تەرەپلىمە ئۆزگىرىشچانلىق ئانالىزى (ANOVA) ئارقىلىق تەھلىل قىلىندى. Tukey سىنىقى سانلىق مەلۇماتلارنى ئۆزئارا سېلىشتۇرۇش ئۈچۈن، Dunnett سىنىقى داۋالاش گۇرۇپپىسى بىلەن مەنپىي كونترول گۇرۇپپىسى ئوتتۇرىسىدىكى سانلىق مەلۇماتلارنى سېلىشتۇرۇش ئۈچۈن ئىشلىتىلدى.
LOEC ۋە NOEC سانلىق مەلۇماتلىرى Dunnett سىنىقى ئارقىلىق تەھلىل قىلىندى. ستاتىستىكىلىق سىناقلار Statistica 8.0 يۇمشاق دېتالى (StatSoft) ئارقىلىق ئېلىپ بېرىلدى، بۇنىڭ ئەھمىيەت دەرىجىسى %95 (p < 0.05).