Nature.com نى زىيارەت قىلغىنىڭىزغا رەھمەت.سىز ئىشلىتىۋاتقان توركۆرگۈنىڭ نەشرىدە CSS قوللىشى چەكلىك.ئەڭ ياخشى ئۈنۈمگە ئېرىشىش ئۈچۈن تور كۆرگۈچىڭىزنىڭ يېڭى نەشرىنى ئىشلىتىشىڭىزنى تەۋسىيە قىلىمىز (ياكى Internet Explorer دىكى ماسلىشىش ھالىتىنى چەكلەڭ).بۇ جەرياندا ، داۋاملىق قوللاشقا كاپالەتلىك قىلىش ئۈچۈن ، بىز ئۇسلۇب ياكى JavaScript ئىشلەتمەي تور بېكەتنى كۆرسىتىۋاتىمىز.
تەبىئىي مەھسۇلاتلارنى بايقاش ۋە پايدىلىق ئىشلىتىش ئىنسانلارنىڭ تۇرمۇشىنى ياخشىلاشقا ياردەم بېرەلەيدۇ.ئۆسۈملۈكلەرنىڭ ئۆسۈشىنى چەكلەيدىغان خىمىيىلىك ماددىلار ئوت-چۆپ يوقىتىش ئۈچۈن ئوت-چۆپ يوقىتىش دورىسى سۈپىتىدە كەڭ قوللىنىلىدۇ.ئوخشىمىغان تىپتىكى ئوت-چۆپ يوقىتىش دورىسى ئىشلىتىش ئېھتىياجى سەۋەبىدىن ، يېڭى ھەرىكەت مېخانىزىمى بولغان بىرىكمىلەرنى پەرقلەندۈرۈش كېرەك.بۇ تەتقىقاتتا بىز Streptomyces werraensis MK493-CF1 دىن N -alkoxypyrrole بىرىكمىسى ، كۇمامونامىد بىرىكمىسىنى بايقىدۇق ۋە مۇكەممەل بىرىكتۈرۈش جەريانىنى بەرپا قىلدۇق.بىئولوگىيىلىك پائالىيەت ئانالىزلىرى ئارقىلىق بىز ئۇر-مونوئىك كىسلاتانىڭ ئۇر-مونوئىدنىڭ بىرىكمە ۋاستىسى ۋە يوشۇرۇن كۈچ ئىكەنلىكىنى بايقىدۇق.ئۆسۈملۈكلەرنىڭ ئۆسۈشىنى تىزگىنلىگۈچى.ئۇنىڭدىن باشقا ، بىز ھەر خىل ئۇربېنونىك كىسلاتا تۇخۇمىنى تەتقىق قىلىپ چىقتۇق ، بۇنىڭ ئىچىدە سۈيدۈك ئاجرىتىش سىستېمىسى (UDA) بار ، بۇ ئۆسۈملۈكلەرنىڭ ئۆسۈملۈك يوقىتىش ئاكتىپلىقى يۇقىرى بولۇپ ، HeLa ھۈجەيرىسىنىڭ ئۆسۈشىگە پاسسىپ تەسىر كۆرسەتمەيدۇ.بىز يەنە سۈيدۈك كىسلاتاسى تۇخۇمىنىڭ ئۆسۈملۈك مىكروبلىرىنى قالايمىقانلاشتۇرىدىغانلىقىنى بايقىدۇق.ئۇنىڭدىن باشقا ، KAND ئاتىنا فىلمېنتىغا تەسىر كۆرسىتىپ ، ھۈجەيرىلەرنىڭ ئۆلۈشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.بۇ كۆپ تەرەپلىمىلىك ئۈنۈملەر داڭلىق مىكروبىلوگنى تىزگىنلىگۈچىلەرنىڭكىگە ئوخشىمايدۇ ھەمدە سۈيدۈك كىسلاتاسىنىڭ يېڭى ھەرىكەت مېخانىزمىنى ئوتتۇرىغا قويدى ، بۇ يېڭى ئۆسۈملۈك دورىلىرىنىڭ تەرەققىياتىدىكى مۇھىم ئەۋزەللىككە ۋەكىللىك قىلىدۇ.
پايدىلىق تەبىئىي مەھسۇلاتلار ۋە ئۇلارنىڭ تۇغۇندى مەھسۇلاتلىرىنى بايقاش ۋە قوللىنىش ئىنسانلارنىڭ تۇرمۇش سۈپىتىنى يۇقىرى كۆتۈرۈشنىڭ ۋاستىسى.مىكرو ئورگانىزملار ، ئۆسۈملۈكلەر ۋە ھاشاراتلار ئىشلەپچىقارغان ئىككىلەمچى مېتابولىزم مېدىتسىنا ۋە دېھقانچىلىقتا زور ئىلگىرىلەشلەرنى قولغا كەلتۈردى.نۇرغۇنلىغان ئانتىبىئوتىكلار ۋە ئاق قانغا قارشى دورىلار تەبىئىي مەھسۇلاتلاردىن ياسالغان.ئۇنىڭدىن باشقا ، ھەر خىلدېھقانچىلىق دورىسى، زەمبۇرۇغ يوقىتىش دورىسى ۋە ئوت يوقىتىش دورىسى بۇ تەبىئىي مەھسۇلاتلاردىن دېھقانچىلىقتا ئىشلىتىلىدۇ.بولۇپمۇ ئوت-چۆپ يوقىتىش دورىلىرى زامانىۋى دېھقانچىلىقتا زىرائەتلەرنىڭ ھوسۇلىنى ئاشۇرۇشتىكى مۇھىم قورال بولۇپ ، ھەر خىل بىرىكمىلەر ئاللىبۇرۇن سودا خاراكتېرلىك ئىشلىتىلگەن.ئۆسۈملۈكلەردىكى فوتوسىنتېز ، ئامىنو كىسلاتانىڭ مېتابولىزمى ، ھۈجەيرە دىۋارىنىڭ بىرىكىشى ، مىتوزنى تەڭشەش ، فىتخورمون سىگنالى ياكى ئاقسىلنىڭ بىرىكىشى قاتارلىق بىر نەچچە ھۈجەيرە جەريانى ئۆسۈملۈك دورىلىرىنىڭ تىپىك نىشانى دەپ قارىلىدۇ.مىكروبىلوگ فۇنكسىيەسىنى چەكلەيدىغان بىرىكمىلەر ئۆسۈملۈكلەرنىڭ ئۆسۈشىگە تەسىر يەتكۈزىدىغان كۆپ خىل ئۆسۈملۈك دورىلىرىدۇر.
مىكرو ئېلېمېنتلار سىتوسكېلېتوننىڭ تەركىبىي قىسمى بولۇپ ، ئېۋكارىئوتىك ھۈجەيرىلەردە كەڭ كۆلەمدە ساقلىنىدۇ.تۇبۇلىن گېرودېرمېر α- تۇبۇلىن ۋە β- تۇبۇلىندىن تۈز سىزىقلىق مىكرو قۇتۇب ھاسىل قىلغۇچى ماددىلارنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ ، 13 خىل ئاقسىل سىلىندىر قۇرۇلمىسىنى ھاسىل قىلىدۇ.مىكرو تىپلىق ئۆسۈملۈك ھۈجەيرىلىرىدە كۆپ خىل رول ئوينايدۇ ، بۇنىڭ ئىچىدە ھۈجەيرە شەكلى ، ھۈجەيرە بۆلۈنۈشى ۋە ھۈجەيرە ئىچىدىكى توشۇش قاتارلىقلار.ئۆسۈملۈك ھۈجەيرىسىدە ئارىلىقتىكى پلازما پەردىسىنىڭ ئاستىدا مىكرو قۇتۇب بار ، بۇ ئاتالمىش پوستلاق پوستلاق قەۋىتى سېللۇلوزا بىرىكمە بىرىكمىلىرىنى تەڭشەش ئارقىلىق سېللۇلوزا مىكرو مۇسكۇللارنىڭ تەشكىللىنىشىنى كونترول قىلىدۇ دەپ قارىلىدۇ.يىلتىز ئېپىدېرما ھۈجەيرىسىنىڭ پوستلاق قەۋىتى مىكروبلىرى ، يىلتىز ئۇچى تېز كېڭىيىش رايونىدا بار ، يان تەرەپكە جايلاشقان ، سېللۇلوزا مىكرو تالالىرى بۇ مىكرو قۇتۇبلارغا ئەگىشىدۇ ۋە ھۈجەيرىلەرنىڭ كېڭىيىش يۆنىلىشىنى چەكلەيدۇ ، بۇ ئارقىلىق ئانتىروسكوپ ھۈجەيرىسىنىڭ ئۇزىراپ كېتىشىنى ئىلگىرى سۈرىدۇ.شۇڭلاشقا ، مىكرو قۇتۇب ئىقتىدارى ئۆسۈملۈك مورفولوگىيىسى بىلەن زىچ مۇناسىۋەتلىك.گېندىكى ئامىنو كىسلاتانىڭ ئورنى تۇبلىننى كودلاشتۇرىدىغان پوستلاق قەۋىتىدىكى مىكرو قۇتۇبىنىڭ قېتىشىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ ۋە Arabidopsis نىڭ سول ياكى ئوڭ تەرىپىنىڭ ئۆسۈشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.ئوخشاشلا ، مىكرو قۇتۇبنىڭ ھەرىكەتچانلىقىنى تەڭشەيدىغان مىكرو قۇتۇب بىلەن مۇناسىۋەتلىك ئاقسىلنىڭ ئۆزگىرىشىمۇ يىلتىزنىڭ بۇرمىلىنىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ 8،9،10،11،12،13.ئۇنىڭدىن باشقا ، دىسوپرامىد قاتارلىق مىكروبوبۇلنى قالايمىقانلاشتۇرىدىغان ئۆسۈملۈك يوقىتىش دورىسى بىلەن داۋالاش يەنە پرىتلاخلور دەپمۇ ئاتىلىدۇ ، ئۇ يەنە سول تەرەپتىكى يانتۇ يىلتىزنىڭ ئۆسۈشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.بۇ سانلىق مەلۇماتلار مىكروبىلوگ فۇنكسىيەسىنى ئېنىق تەڭشەش ئۆسۈملۈكلەرنىڭ ئۆسۈش يۆنىلىشىنى بەلگىلەشتە ئىنتايىن مۇھىملىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.
ھەر خىل تىپتىكى مىكروبىلوگنى تىزگىنلىگۈچىلەر بايقالدى ، بۇ دورىلار سىتوسېلكېل تەتقىقاتى ، شۇنداقلا دېھقانچىلىق ۋە تېبابەتچىلىككە مۇھىم تۆھپە قوشتى.بولۇپمۇ ئورىزالىن ، دىنتروئانىلىن بىرىكمىسى ، دىسوپرامىد ، بېنزامىد بىلەن مۇناسىۋەتلىك بىرىكمىلەر ۋە ئۇلارنىڭ ئوخشىتىشلىرى مىكروبوبىلنىڭ ئىقتىدارىنى تورمۇزلاپ ، شۇ ئارقىلىق ئۆسۈملۈكلەرنىڭ ئۆسۈشىنى تورمۇزلايدۇ.شۇڭلاشقا ، ئۇلار ئوت-چۆپ يوقىتىش دورىسى سۈپىتىدە كەڭ قوللىنىلىدۇ.قانداقلا بولمىسۇن ، مىكرو قۇتۇبلار ئۆسۈملۈك ۋە ھايۋانات ھۈجەيرىلىرىنىڭ مۇھىم تەركىبىي قىسمى بولغاچقا ، كۆپىنچە مىكرو تىپلىق تورمۇزلىغۇچىلار ھەر ئىككى ھۈجەيرە تىپىغا نىسبەتەن سىتاتسىك بولىدۇ.شۇڭلاشقا ، ئۇلارنىڭ ئوت-چۆپ يوقىتىش دورىسى دەپ ئېتىراپ قىلىنغانلىقىغا قارىماي ، چەكلىك مىقداردا باكتېرىيەگە قارشى تۇرغۇچى ماددىلار ئەمەلىي مەقسەتتە ئىشلىتىلىدۇ.
Streptomyces بولسا Streptomyces جەمەتىنىڭ بىر تۈرى بولۇپ ، ئۇ ئاۋىئاتسىيە ، گرام مۇسبەت ، يىرىڭلىق باكتېرىيەنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ ھەمدە كۆپ خىل ئىككىلەمچى مېتابولىتلارنى ئىشلەپچىقىرىش ئىقتىدارى بىلەن داڭلىق.شۇڭلاشقا ، ئۇ يېڭى بىئولوگىيىلىك ئاكتىپ تەبىئىي مەھسۇلاتلارنىڭ ئەڭ مۇھىم مەنبەلىرىنىڭ بىرى دەپ قارىلىدۇ.نۆۋەتتىكى تەتقىقاتتا ، coumamonamide دەپ ئاتىلىدىغان يېڭى بىرىكمىنى بايقىدۇق ، ئۇ Streptomyces werraensis MK493-CF1 ۋە S. werraensis ISP 5486 دىن ئايرىپ ئېلىنغان. بېكىتىلدى.بىرىكمە.ئۇرسمونىك كىسلاتاسى ، ئۇرمونوئامىد ۋە ئۇنىڭ تۇغۇندى ماددىلىرىنىڭ بىرىكمە ۋاسىتىسى بولۇپ ، داڭلىق مودېل ئۆسۈملۈك Arabidopsis thaliana نىڭ ئۆسۈشى ۋە بىخلىنىشىنى چەكلەيدۇ.قۇرۇلما-پائالىيەت مۇناسىۋىتى تەتقىقاتىدا ، C9 بىلەن سۈيدۈك كىسلاتاسىغا ئۆزگەرتىلگەن بىرىكمىنىڭ سۈيدۈك كىسلاتاسى (KAND) نىڭ nonyloxy تۇخۇمى دەپ ئاتىلىدىغان بىرىكمىنىڭ ئۆسۈشى ۋە بىخلىنىشىدىكى تورمۇزلاش ئۈنۈمىنى كۆرۈنەرلىك كۈچەيتىدىغانلىقىنى بايقىدۇق.تىلغا ئېلىشقا ئەرزىيدىغىنى ، يېڭىدىن بايقالغان ئۆسۈملۈكلەرنىڭ ئۆسۈشىنى چەكلەش يەنە تاماكا ۋە جىگەر ۋىرۇسىنىڭ ئۆسۈشىگە تەسىر كۆرسىتىپ ، باكتېرىيە ياكى HeLa ھۈجەيرىسىگە سىتاتسىك ئەمەس.ئۇنىڭ ئۈستىگە ، بىر قىسىم ئۇرموتونىك كىسلاتا تۇخۇمى بۇرمىلانغان يىلتىز فېنوتىپنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ ، بۇ تۇغۇندى ماددىلارنىڭ مىكرو قۇتۇبىغا بىۋاسىتە ياكى ۋاسىتىلىك تەسىر قىلىدىغانلىقىنى كۆرسىتىدۇ.بۇ پىكىرگە ماس ھالدا ، بىزنىڭ ئىممۇنىتېتلىق خىمىيىلىك ياكى فلۇئورېسسېنسىيەلىك ئاقسىل دەپ بەلگە قويۇلغان مىكرو قۇتۇبنى كۆزىتىشىمىز KAND داۋالاشنىڭ مىكرو قۇتۇبنى تۆۋەنلىتىۋېتىدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.ئۇنىڭدىن باشقا ، كۇماموتونىك كىسلاتا تۇخۇمى بىلەن داۋالاش ئاتىن مىكرو ئېلېمېنتلىرىنى قالايمىقانلاشتۇردى.شۇڭا ، بىز يېڭى ئۆسۈملۈكنىڭ ئۆسۈشىنى تىزگىنلىگۈچىنى بايقىدۇق ، ئۇنىڭ ئۆزگىچە ھەرىكەت مېخانىزمى سىتوسكېلېتوننى يوقىتىشنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ.
Strain MK493-CF1 توكيونىڭ شىناگاۋا-كۇدىكى تۇپراقتىن ئايرىۋېتىلدى.Strain MK493-CF1 ياخشى شاخلانغان ئۆسمە مېڭە ھاسىل قىلدى.16S رىبوسومال RNA گېنىنىڭ قىسمەن تەرتىپى (1422 bp) بېكىتىلدى.بۇ بېسىم S. werraensis بىلەن ناھايىتى ئوخشايدۇ (NBRC 13404T = ISP 5486 ، 1421/1422 bp ، T: تىپىك بېسىم ،% 99.93).بۇ نەتىجىگە ئاساسەن ، بۇ جىددىيلىكنىڭ S. werraensis نىڭ تىپىدىكى جىددىيلىكى بىلەن زىچ مۇناسىۋەتلىك ئىكەنلىكى ئېنىقلاندى.شۇڭلاشقا ، بىز بۇ جىددىيلىككە S. werraensis MK493-CF1 دەپ ۋاقىتلىق ئىسىم قويدۇق.S. werraensis ISP 5486T مۇ ئوخشاش بىئولوگىيىلىك بىرىكمىلەرنى ھاسىل قىلىدۇ.بۇ مىكرو ئورگانىزمدىن تەبىئىي مەھسۇلاتقا ئېرىشىش توغرىسىدا دەسلەپكى تەتقىقاتلار ئاز بولغاچقا ، يەنىمۇ ئىلگىرىلىگەن ھالدا خىمىيىلىك تەتقىقاتلار ئېلىپ بېرىلدى.ئارپا ۋاستىسىدە S. werraensis MK493-CF1 نى 30 سېلسىيە گرادۇسلۇق قاتتىق ئېچىتىش ئارقىلىق 14 كۈن ئۆستۈرگەندىن كېيىن ،% 50 لىك EtOH بىلەن بۇ ۋاسىتە ئېلىنغان.59.5 مىللىگىرام خام ئەشياغا ئېرىشىش ئۈچۈن 60 مىللىلېتىر ئەۋرىشكە قۇرۇتۇلدى.خام جەۋھەر HPLC نىڭ تەتۈر باسقۇچلۇق تەسىرىگە ئۇچرىغان بولۇپ ، N-metxy-1H-pyrrole-2-carboxamide (1 ، coumamonamide ، 36.0 mg).ئومۇمىي مىقدارى 1 خام نېفىت جەۋھىرىنىڭ تەخمىنەن% 60.شۇڭلاشقا ، بىز kumamotoamide 1 نىڭ خۇسۇسىيەتلىرىنى تەپسىلىي تەتقىق قىلىشنى قارار قىلدۇق.
Coumamonamide 1 ئاق رەڭلىك ئامورفوس پاراشوكى بولۇپ ، يۇقىرى ئېنىقلىقتىكى ماسسىلىق سپېكترى (HRESIMS) C6H8N2O2 نى دەلىللەيدۇ (1-رەسىم).بۇ بىرىكمىنىڭ C2 نىڭ ئورنىنى ئالغان پىرولول پارچىسى δH 6.94 (1H ، t ، J = 2.8 ، 4.8 Hz ، H-4) ، δH 6.78 (1H ، d ، J = 2.5 ، δH) 1H NMR سپېكترى: 4.5 Hz ، H-5) ۋە δH 6.78 (1H ، d ، J = 2.5 Hz ، H-6) ، 13C NMR سپېكترى تۆت sp2 كاربون ئاتومنىڭ بارلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.C2 ئورنىدا ئامىد گۇرۇپپىسىنىڭ بارلىقى HMBC نىڭ C-3 پروتوندىن ئامىد كاربونېل كاربون δC 161.1 دىكى باغلىنىشى بىلەن باھالانغان.بۇنىڭدىن باشقا ، 1 H ۋە 13 C NMR چوققىسى δH 4.10 (3H, S) ۋە δC 68.3 دىكى مولېكۇلادا N- مېتوكسى گۇرۇپپىسىنىڭ بارلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.گەرچە كۈچەيتىلگەن پەرق سپېكتروسكوپى ۋە يادرو رېمونت قىلىش قىسقارتىلمىسى (NOEDF) قاتارلىق سپېكتروسكوپ ئانالىزىدىن پايدىلىنىپ مېتوك گۇرۇپپىسىنىڭ توغرا ئورنى تېخى بېكىتىلمىگەن بولسىمۇ ، ئەمما N-methoxy-1H-pyrrole-2-carboxamide تۇنجى كاندىدات بىرىكمىسى بولۇپ قالدى.
1 نىڭ توغرا قۇرۇلمىسىنى ئېنىقلاش ئۈچۈن ، ئومۇمىي بىرىكتۈرۈش ئېلىپ بېرىلدى (2a رەسىم).سودا خاراكتېرلىك 2-ئامىنوپىرىدېن 2 نى m-CPBA بىلەن داۋالاش نەتىجىسىدە ماس كېلىدىغان N ئوكسىد 3 نىڭ مىقدارى مول بولدى.2 نىڭ 2-ئامىنوئازلاشتۇرۇلغاندىن كېيىن ، ئابراموۋىچ تەسۋىرلىگەن سىكلوكېندېنسىيە رېئاكسىيەسى بېنزولدا 90 سېلسىيە گرادۇستا ئېلىپ بېرىلىپ ، كۆزلىگەن 1 گىدروكىسسى 1H- پىرولول 2 كاربوناترىل 5 گرامغا ئېرىشتى.سۈرئەت 60% (ئىككى باسقۇچ).15,16.مېتىللاشتۇرۇش ۋە ھىدرولىزلاش 4 دىن كېيىن 1-مېتوكسىمان -1H- پىرولول -2 كاربون كىسلاتا («كۇموتونىك كىسلاتا» دېيىلىدۇ ، 6) ياخشى ھوسۇل بەردى (% 70 ، ئىككى باسقۇچ).ئاخىرىدا ، سۇيۇق ئاممىياك ئىشلىتىپ كىسلاتا خلور ئارىلىقى 6 ئارقىلىق كۇماموتوغا% 98 مەھسۇلات بەردى.بىرىكتۈرۈلگەن 1 نىڭ بارلىق سپېكترى سانلىق مەلۇماتلىرى يەككە 1 گە ئوخشايتتى ، شۇڭا 1 نىڭ قۇرۇلمىسى بېكىتىلدى.
ئۇربېنامىد ۋە سۈيدۈك كىسلاتاسىنىڭ بىئولوگىيىلىك پائالىيىتىنى ئومۇمىي بىرىكتۈرۈش ۋە ئانالىز قىلىش.(1) Kumamoto amide نىڭ ئومۇمىي بىرىكىشى.(b) يەتتە كۈنلۈك ياۋا تىپتىكى Arabidopsis كولۇمبىيە (كول) مايسىلىرى كۆرسىتىلگەن قويۇقلۇق دەرىجىسىدە مۇراشىگې ۋە سكوگ (MS) تاختىسىدا ئۆستۈرۈلدى.كىچىك بالداق = 1 سانتىمېتىر.
بىرىنچىدىن ، بىز ئۇربېنامىد ۋە ئۇنىڭ ۋاسىتىچىلىرىنىڭ بىئولوگىيىلىك پائالىيىتىنى ئۆسۈملۈكلەرنىڭ ئۆسۈشىنى تەڭشەش ئىقتىدارىغا باھالىدۇق.بىز بۇ ۋاستىگە MS ئاگار ئوتتۇرا ۋە مەدەنىيەتلىك Arabidopsis thaliana مايسىلىرىغا ھەر خىل قويۇقلۇق دەرىجىسى ئۇرسونامىد 1 ياكى سۈيدۈك كىسلاتاسى 6 نى قوشتۇق.بۇ ئانالىزلار شۇنى ئىسپاتلىدىكى ، يۇقىرى قويۇقلۇق دەرىجىسى (500 μ mM) 6 يىلتىزنىڭ ئۆسۈشىنى تورمۇزلىدى (2b رەسىم).كېيىنكى قەدەمدە ، بىز N1 ئورنىنى 6 نىڭ ئورنىغا دەسسىتىش ئارقىلىق ھەر خىل تۇغۇندى مەھسۇلاتلارنى ھاسىل قىلدۇق ۋە ئۇلار ئۈستىدە قۇرۇلما - پائالىيەت مۇناسىۋىتى تەتقىقاتى ئېلىپ باردۇق (تەقلىد قىلىش بىرىكمىسى جەريانى قوللاش ئۇچۇرلىرى (SI) دا تەسۋىرلەنگەن).Arabidopsis مايسىلىرى تەركىبىدە 50 μM سۈيدۈك كىسلاتاسى ھاسىل بولغان ۋاسىتىدە ئۆستۈرۈلۈپ ، يىلتىز ئۇزۇنلۇقى ئۆلچەم قىلىندى.رەسىمدە كۆرسىتىلگەندەك.3a ، b ۋە S1 رەسىملەردە كۆرسىتىلگەندەك ، كۇمامو كىسلاتاسىنىڭ ئۇزۇنلۇقى ئۇزۇن سىزىقلىق ئالكوكىس زەنجىرى (9 ، 10 ، 11 ، 12 ۋە 13) ياكى N1 ئورنىدا چوڭ ئالكوكىس زەنجىرى (15 ، 16 ۋە 17).تۇغۇندى يىلتىزنىڭ ئۆسۈشىنى كۆرۈنەرلىك چەكلىگەنلىكىنى كۆرسەتتى.ئۇنىڭدىن باشقا ، 200 μM 10 ، 11 ياكى 17 نى ئىشلىتىشنىڭ توسقۇنلۇققا ئۇچرىغانلىقىنى بايقىدۇق (3c ۋە S2).
Kumamoto amide ۋە مۇناسىۋەتلىك بىرىكمىلەرنىڭ قۇرۇلما-پائالىيەت مۇناسىۋىتىنى تەتقىق قىلىش.(1) ئوخشىتىشنىڭ قۇرۇلمىسى ۋە بىرىكتۈرۈش لايىھىسى.(2) MS ئوتتۇراھالدا ئۆستۈرۈلگەن 7 كۈنلۈك كۆچەتنىڭ يىلتىز ئۇزۇنلۇقىنىڭ مىقدارى 50 μ mM كۇمۇمونامىد تۇخۇمى بار ياكى يوق.يۇلتۇزلار ئالدامچىلىق بىلەن داۋالاشنىڭ كۆرۈنەرلىك پەرقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ (t سىناق ، p<0.05).n>18. سانلىق مەلۇماتلار mean SD شەكلىدە كۆرسىتىلىدۇ.nt «سىناق قىلىنمىغان» دېگەنلىك بولىدۇ ، چۈنكى% 50 تىن ئارتۇق ئۇرۇق بىخلانمايدۇ.(3) بىر تەرەپ قىلىنغان ئۇرۇقنىڭ بىخلىنىش نىسبىتىنى MS ئوتتۇراھالدا 7 كۈن سىڭدۈرگەن ياكى 200 μ mM كومامونامىد ۋە مۇناسىۋەتلىك بىرىكمىلەر بار.Asterisks ئالدامچىلىق بىلەن داۋالاشنىڭ كۆرۈنەرلىك پەرقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ (چى چاسا سىنىقى).n = 96.
قىزىقارلىق يېرى ، ئالكىل يان زەنجىرىنىڭ قوشۇلۇشى C9 دىن ئۇزۇن بولۇپ ، تورمۇزلىنىش پائالىيىتىنى ئازايتقان ، بۇ كۇماموتوئىك كىسلاتاغا مۇناسىۋەتلىك بىرىكمىلەرنىڭ بىئولوگىيىلىك پائالىيىتىنى نامايان قىلىش ئۈچۈن مەلۇم چوڭلۇقتىكى يان زەنجىرگە ئېھتىياجلىق ئىكەنلىكىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.
قۇرۇلما-پائالىيەت مۇناسىۋىتى ئانالىزىدا C9 نىڭ سۈيدۈك كىسلاتاسىغا ئۆزگەرتىلگەنلىكى ۋە سۈيدۈك كىسلاتاسىنىڭ ناتونۇش ماددىسىنىڭ (تۆۋەندە KAND 11 دېيىلىدۇ) ئۆسۈملۈكلەرنىڭ ئۆسۈشىنى تىزگىنلەشتىكى ئەڭ ئۈنۈملۈك ئامىل بولغانلىقى ئۈچۈن ، بىز KAND 11 نىڭ تېخىمۇ تەپسىلىي ئالاھىدىلىكىنى ئېلىپ باردۇق. 50 μM KAND 11 بىلەن ئاساسەن دېگۈدەك بىخلىنىشنىڭ ئالدىنى ئالدى ، ئەمما KAND 11 نىڭ تۆۋەن قويۇقلۇقى (40 ، 30 ، 20 ياكى 10 mMM) مىقدارىغا تايىنىش شەكلىدە يىلتىزنىڭ ئۆسۈشىنى تورمۇزلىدى (4a ، b).KAND 11 نىڭ يىلتىز مېرسىزىمنىڭ ھاياتىي كۈچىگە تەسىر كۆرسىتەلەيدىغان ياكى تەسىر كۆرسىتەلمەيدىغانلىقىنى سىناش ئۈچۈن ، بىز پرودىدىي يود (PI) بىلەن بويالغان يىلتىز مېرتېمىنى تەكشۈردۇق ۋە مېرستېم رايونىنىڭ چوڭ-كىچىكلىكىنى ئۆلچەپ چىقتۇق.25 μM KAND-11 بولغان ئوتتۇراھالدا ئۆستۈرۈلگەن مايسىلارنىڭ چوڭ-كىچىكلىكى 151.1 ± 32.5 مىللىمېتىر ، DMSO بولغان كونترول ۋاسىتىسىدە ئۆستۈرۈلگەن مايسىلارنىڭ چوڭلۇقى 264.7 ± 30.8 mm (رەسىم 4c ، d) ، بۇ KAND-11 نىڭ ھۈجەيرە ھەرىكىتىنى ئەسلىگە كەلتۈرىدىغانلىقىنى كۆرسىتىدۇ.تارقىتىۋاتىدۇ.Root meristem.بۇنىڭغا ماس ھالدا ، KAND 11 داۋالاش ئۇسۇلى CDKB2 نىڭ ھۈجەيرە بۆلۈش بەلگىسىنىڭ مىقدارىنى ئازايتتى ؛ 1p :: CDKB2 ؛ يىلتىز مېرستىمىدىكى 1-GUS سىگىنالى (4e رەسىم) 17.بۇ نەتىجىلەر KAND 11 نىڭ ھۈجەيرىلەرنىڭ كۆپىيىش ھەرىكىتىنى ئازايتىش ئارقىلىق يىلتىزنىڭ ئۆسۈشىنى چەكلەيدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.
ئۇربېنونىك كىسلاتا تۇخۇمى (urbenyloxy تۇخۇمى) نىڭ ئۆسۈشىنى تورمۇزلاش ئۈنۈمىنى تەھلىل قىلىش.(a) 7 كۈنلۈك ياۋا تىپتىكى كول مايسىلىرى MS تاختىسىدا كۆرسىتىلگەن قويۇقلۇقى KAND 11. چوڭ-كىچىكلىكى = 1 سانتىمېتىر.(2) يىلتىز ئۇزۇنلۇقىنىڭ سانى.ھەرپلەر كۆرۈنەرلىك پەرقلەرنى كۆرسىتىدۇ (Tukey HSD سىنىقى ، p<0.05).n>16. سانلىق مەلۇماتلار ± SD شەكلىدە كۆرسىتىلىدۇ.(3) پرودىدىي يود بىلەن بويالغان ياۋا تىپتىكى كول يىلتىزىنىڭ ماس قەدەملىك مىكروسكوپى MS تاختىسىدا 25 μMM KAND بار ياكى ئۆسمىگەن.كىچىك بالداق = 100 µm.(d) يىلتىز meristem نىڭ چوڭ-كىچىكلىكى (n = 10 دىن 11 گىچە).ستاتىستىكا پەرقى t- سىناق ئارقىلىق بېكىتىلدى (p<0.05).بالداقلار ئوتتۇرىچە مەرتىۋىلىك چوڭلۇققا ۋەكىللىك قىلىدۇ.(5) CDKB2 قۇرۇلمىسىنى ئۆز ئىچىگە ئالغان يىلتىز meristem نىڭ پەرقلىق ئارىلىشىش سېلىشتۇرمىسى (DIC) مىكروسكوپى.1pro: CDKB2;1-GUS 25 µM KAND تەكشۈرۈشى بار ياكى يوق MS تاختىسىدا ئۆستۈرۈلگەن 5 كۈنلۈك مايسىلارغا داغ ۋە داغ چۈشۈردى.
KAND 11 نىڭ فىترو زەھەرلىكلىكى باشقا ئىككى خىل ئۆسۈملۈك ، تاماكا (Nicotiana tabacum) ۋە ئاساسلىق قۇرۇقلۇق ئۆسۈملۈك مودېل ئورگانىزىمى ، جىگەر ۋىرۇسى (Marchantia polymorpha) ئارقىلىق سىناق قىلىنغان.Arabidopsis غا ئوخشاش ، 25 μM KAND 11 بولغان ئوتتۇراھالدا ئۆستۈرۈلگەن تاماكا SR-1 مايسىلىرى قىسقا يىلتىز ھاسىل قىلدى (5a رەسىم).بۇنىڭدىن باشقا ، 48 دانە ئۇرۇقنىڭ 40 ى 200 μM KAND 11 بولغان تاختايلاردا بىخلاندى ، ھالبۇكى 48 ئۇرۇقنىڭ ھەممىسى مەسخىرە قىلىنغان مېدىيادا بىخلىنىپ ، KAND نىڭ قويۇقلۇقىنىڭ كۆرۈنەرلىك ئىكەنلىكىنى كۆرسەتتى.<0.05;chi test -square) تاماكىنىڭ بىخلىنىشىنى چەكلىدى.(5-رەسىم).ئۇنىڭدىن باشقا ، KAND 11 نىڭ قويۇقلۇقى جىگەر ۋىرۇسىنىڭ باكتېرىيە ئۆسۈشىنى چەكلەيدىغان قويۇقلۇقى Arabidopsis دىكى ئۈنۈملۈك قويۇقلۇقى بىلەن ئوخشاش (5c رەسىم).بۇ نەتىجىلەر KAND 11 نىڭ ھەر خىل ئۆسۈملۈكلەرنىڭ ئۆسۈشىنى تورمۇزلىيالايدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بەردى.ئاندىن بىز باشقا جانلىقلاردىكى ئېيىق مونوئىد بىلەن مۇناسىۋەتلىك بىرىكمىلەرنىڭ ئىنسانلارنىڭ HeLa ھۈجەيرىسى ۋە Escherichia coli سۈزگۈچ DH5α نىڭ سىتوتسىك زەھىرىنى ئايرىم-ئايرىم ھالدا يۇقىرى ھايۋان ۋە باكتېرىيە ھۈجەيرىسىنىڭ ۋەكىلى سۈپىتىدە تەكشۈردۇق.بىر قاتار ھۈجەيرىلەرنىڭ كۆپىيىشىدە ، بىز كۇئامونامىد 1 ، كۇئامونامىد كىسلاتاسى 6 ۋە KAND 11 نىڭ 100 μMM قويۇقلۇقىدىكى HeLa ياكى E. coli ھۈجەيرىسىنىڭ ئۆسۈشىگە تەسىر كۆرسەتمەيدىغانلىقىنى بايقىدۇق (5d ، e).
Arabidopsis بولمىغان جانلىقلاردا KAND 11 نىڭ ئۆسۈشىنى چەكلەش.. 200 μM KAND بولغان MS تاختىلىرى. مەزگىل.(4) HeLa ھۈجەيرىسىنىڭ ھۈجەيرىلەرنىڭ كۆپىيىشى.ھاياتى كۈچكە ئىگە ھۈجەيرىلەرنىڭ سانى ھۈجەيرە ھېسابلاش زاپچىسى 8 (Dojindo) ئارقىلىق مۇقىم ۋاقىت ئارىلىقىدا ئۆلچەنگەن.كونترول قىلىش سۈپىتىدە ، HeLa ھۈجەيرىلىرى 5 μ mg / ml actinomycin D (Act D) بىلەن بىر تەرەپ قىلىندى ، بۇ RNA پولىمېرازا كۆچۈرۈلۈشىنى تورمۇزلاپ ، ھۈجەيرىلەرنىڭ ئۆلۈشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.ئانالىز ئۈچ خىل ئۇسۇلدا ئېلىپ بېرىلدى.(5) E. coli ھۈجەيرىسىنىڭ كۆپىيىشى.E. coli نىڭ ئۆسۈشى OD600 نى ئۆلچەش ئارقىلىق ئانالىز قىلىنغان.كونترول قىلىش سۈپىتىدە ، ھۈجەيرىلەر باكتېرىيە ھۈجەيرىسىنىڭ تېمىنىڭ بىرىكىشىنى چەكلەيدىغان 50 mg / ml ئامپىسلىن (Amp) بىلەن بىر تەرەپ قىلىندى.ئانالىز ئۈچ خىل ئۇسۇلدا ئېلىپ بېرىلدى.
ئۇرامىد بىلەن مۇناسىۋەتلىك بىرىكمىلەر كەلتۈرۈپ چىقارغان سىتاتسىك زەھىرىنىڭ ھەرىكەت مېخانىزمىنى يېشىش ئۈچۈن ، بىز ئوتتۇراھال تورمۇزلاش رولى بار ئۇربېن كىسلاتا تۇخۇمىنى قايتا ئانالىز قىلدۇق.رەسىمدە كۆرسىتىلگەندەك.2b ، 6a رەسىمدە كۆرسىتىلگەندەك ، ئۇرموتونىك كىسلاتا 6 نىڭ قويۇقلۇقى يۇقىرى (200 mMM) بولغان ئاگار تەخسىسىدە ئۆستۈرۈلگەن مايسىلار قىسقا ۋە سول ئەگرى يىلتىز ھاسىل قىلدى (θ = - 23.7 ± 6.1) ، ئەمما كونترول ۋاسىتىسىدە ئۆستۈرۈلگەن مايسىلار ، مايسىلار ئاساسەن دېگۈدەك تۈز يىلتىز ھاسىل قىلدى (θ = - 3.8 ± 7.1).بۇ خىل يانتۇ ئۆسمىنىڭ پوستلاق قەۋىتىدىكى مىكرو تومۇرنىڭ نورمال بولماسلىقىدىن كېلىپ چىققانلىقى مەلۇم.بۇ بايقاشقا ماس ھالدا ، مىكرو قۇتۇبنى تۇراقسىزلاشتۇرىدىغان دورىلار دىسوپرامىد ۋە ئورىزالىن بىزنىڭ ئۆسۈپ يېتىلىش شارائىتىمىزدا مۇشۇنىڭغا ئوخشاش يىلتىز يانتۇ پەيدا قىلدى (2b ، 6a رەسىم).شۇنىڭ بىلەن بىر ۋاقىتتا ، بىز ئۇرموتونىك كىسلاتا تۇخۇمىنى سىناق قىلىپ ، ئۇلارنىڭ بىر نەچچىسىنى تاللىدۇق ، ئۇلار مەلۇم قويۇقلۇقتا يانتۇ يىلتىزنىڭ ئۆسۈشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.8 ، 9 ۋە 15 بىرىكمىلەر يىلتىزنىڭ ئۆسۈش يۆنىلىشىنى ئايرىم-ئايرىم ھالدا 75 mMM ، 50 μ mM ۋە 40 mMM غا ئۆزگەرتتى ، بۇ بىرىكمىلەرنىڭ مىكرو قۇتۇبنى ئۈنۈملۈك مۇقىمسىزلاشتۇرىدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ (2b ، 6a رەسىم).بىز يەنە ئەڭ كۈچلۈك سۈيدۈك كىسلاتاسى تۇخۇمى KAND 11 نى تۆۋەن قويۇقلۇقتا (15 µM) سىناق قىلىپ ، KAND 11 نى ئىشلىتىشنىڭ يىلتىزنىڭ ئۆسۈشىنى تورمۇزلايدىغانلىقىنى ۋە يىلتىزنىڭ ئۆسۈش يۆنىلىشىنىڭ تەكشى ئەمەسلىكىنى بايقىدۇق ، گەرچە ئۇلار سول تەرەپكە ئېغىشقا مايىل بولغان ( رەسىم C3)..مىكرو قويۇقلۇقنى تۇراقسىزلاشتۇرىدىغان دورىلارنىڭ قويۇقلۇقى بەزىدە ئۆسۈملۈكنىڭ ئۆسۈشىنى تورمۇزلاشنى كەلتۈرۈپ چىقارماستىن ، بەلكى ئۆسۈملۈكلەرنىڭ ئۆسۈشىنى تورمۇزلايدۇ ، شۇڭا بىز KAND 11 نىڭ يىلتىز ئېپىدېرما ھۈجەيرىسىدىكى پوستلاق قەۋىتىنى كۆزىتىش ئارقىلىق مىكرو مۇسكۇلغا تەسىر قىلىش ئېھتىماللىقىنى باھالىدۇق.ئىممۇنىتېتلىق خىمىيىلىك ماددا 25 μM KAND 11 بىلەن بىر تەرەپ قىلىنغان كۆچەت يىلتىزىنىڭ ئېپىدېرما ھۈجەيرىسىدە tub- تۇبۇلىنغا قارشى ئانتىتېلا ئىشلىتىپ ، ئۇزۇنغا سوزۇلغان رايوندىكى ئېپىدېرما ھۈجەيرىسىدىكى پوستلاق مىكروبلىرىنىڭ ھەممىسىنىڭ يوقالغانلىقىنى كۆرسەتتى (6b رەسىم).بۇ نەتىجىلەر كۇماموتون كىسلاتاسى ۋە ئۇنىڭ تۇغۇندى ماددىلىرىنىڭ مىكرو قۇتۇبىدا بىۋاسىتە ياكى ۋاسىتىلىك ھالدا ئۇلارنى قالايمىقانلاشتۇرۇۋېتىدىغانلىقىنى ۋە بۇ بىرىكمىلەرنىڭ رومان مىكروبوبىلنى تىزگىنلىگۈچى ئىكەنلىكىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.
ئۇرسون كىسلاتاسى ۋە ئۇنىڭ تۇغۇندى ماددىلىرى Arabidopsis thaliana دىكى پوستلاق قەۋىتىنى ئۆزگەرتىدۇ.(1) كۆرسىتىلگەن قويۇقلۇقتىكى ھەر خىل ئۇرموتونىك كىسلاتا تۇخۇمى بارلىقىدا ئۆلچەنگەن يىلتىز يانتۇ بۇلۇڭى.مىكروبوبىلنى تىزگىنلەيدىغان ئىككى خىل بىرىكمىنىڭ تەسىرى: دىسوپرامىد ۋە ئورىزالىنمۇ تەھلىل قىلىنغان.بۇ قىستۇرما يىلتىزنىڭ ئۆسۈش بۇلۇڭىنى ئۆلچەشتە ئىشلىتىلىدىغان ئۆلچەمنى كۆرسىتىدۇ.يۇلتۇزلار ئالدامچىلىق بىلەن داۋالاشنىڭ كۆرۈنەرلىك پەرقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ (t سىناق ، p<0.05).n>19. كىچىك بالداق = 1 سانتىمېتىر.(2) ئۇزارتىش رايونىدىكى ئېپىدېرما ھۈجەيرىسىدىكى پوستلاق قەۋىتى.ياۋا تىپتىكى Arabidopsis Col نىڭ يىلتىزى 25 μM KAND 11 بولغان MS تاختىسىدا ئۆستۈرۈلگەن كول يىلتىزى β-tubulin دەسلەپكى ئانتىتېلاسى ۋە Alexa Fluor بىرىكتۈرۈلگەن ئىككىلەمچى ئانتىتېلا ئارقىلىق ئىممۇنىتېتلىق خىمىيىلىك داغ ئارقىلىق تەسۋىرلەنگەن.كىچىك بالداق = 10 µm.(3) يىلتىز مېرستىمىدىكى مىكرو قۇتۇبنىڭ مىتوتىك قۇرۇلمىسى.مىكرو ئېلېمېنتلار ئىممۇنىتېتلىق خىمىيىلىك داغ ئارقىلىق تەسۋىرلەنگەن.مىتابولىزىم قۇرۇلمىلىرى ، جۈملىدىن پروفا رايونى ، پالەك ۋە فراگماپلاستلارنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ.ئوقيا مىتروتىك مىكرو ئېلېمېنت قۇرۇلمىسىنى كۆرسىتىدۇ.يۇلتۇزلار ئالدامچىلىق بىلەن داۋالاشنىڭ كۆرۈنەرلىك پەرقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ (t سىناق ، p<0.05).n>9. كىچىك بالداق = 50 µm.
گەرچە ئۇرسانىڭ مىكرو قۇتۇب ئىقتىدارىنى قالايمىقانلاشتۇرۇش ئىقتىدارى بولسىمۇ ، ئەمما ئۇنىڭ ھەرىكەت مىخانىزىمىنىڭ تىپىك مىكرو قۇتۇبنى يوقىتىش دورىسى بىلەن ئوخشىماسلىقىدىن ئۈمىد بار.مەسىلەن ، دىسوپرامىد ۋە ئورېزالىن قاتارلىق مىكرو ئېلېمېنتلارنىڭ قويۇقلۇقى يۇقىرى قويۇقلۇق دەرىجىسى ئېپىدېرما ھۈجەيرىسىنىڭ ئانسوتروپىك كېڭىيىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ ، ئەمما KAND 11 ئۇنداق ئەمەس.ئۇنىڭدىن باشقا ، KAND 11 بىلەن دىسوپرامىدنىڭ ئورتاق قوللىنىلىشى دىسوپرامىد كەلتۈرۈپ چىقارغان يىلتىزنىڭ ئۆسۈشىگە ئىنكاس قايتۇردى ۋە KAND 11 كەلتۈرۈپ چىقارغان ئۆسۈشنى چەكلەش كۆرۈلدى (S4 رەسىم).بىز يەنە زىيادە سېزىمچان دىسوپرامىدنىڭ 1-1 (phs1-1) ئۆزگىرىشچان KAND 11 گە بولغان ئىنكاسىنى ئانالىز قىلدۇق.phs1-1 ئۆزگەرتىلگەن كۆچەتنىڭ تەركىبىدە KAND 11 بار بولۇپ ، يىلتىزى دىسوپىرامىدا ئۆسكەنگە ئوخشاش قىسقا يىلتىز تارتقان (S5 رەسىم).
ئۇنىڭدىن باشقا ، بىز KAND 11 بىلەن بىر تەرەپ قىلىنغان كۆچەتلەرنىڭ يىلتىز مېرستىمىدا پروفازا رايونى ، يۇمىلاق شەكىللىك ۋە فراگما پىلاستىنكىسى قاتارلىق مىتوتىك مىكرو مىكرو قۇرۇلمىلارنى كۆزەتتۇق. CDKB2 كۆزىتىشكە ماس كېلىدۇ ؛ 1p :: CDKB2; 1-GUS ، كۆرۈنەرلىك تۆۋەنلەش. مىتوتىك مىكرو قۇتۇبلارنىڭ سانى تەكشۈرۈلگەن (6-رەسىم).
KAND 11 نىڭ سىتراتىگىيەلىك خۇسۇسىيىتىنى ئېنىقلاش ئۈچۈن ، بىز KAND 11 بىلەن تاماكا BY-2 ئاسما ھۈجەيرىسىنى داۋالىدۇق ۋە ئۇلارنىڭ ئىنكاسىنى كۆزەتتۇق.بىز ئالدى بىلەن KAND 11 نى BY-2 ھۈجەيرىسىگە قوشتۇق ، ئۇ TagRFP-TUA6 نى ئىپادىلەيدۇ ، بۇ فتور فېرمېنسىيىلىك ھالدا مىكرو قۇتۇب دەپ بەلگە قويۇلغان بولۇپ ، KAND 11 نىڭ پوستلاق مىكرو قۇتۇبىغا بولغان تەسىرىنى باھالىدۇق.مېڭە پوستلاق قەۋىتىنىڭ زىچلىقى رەسىم ئانالىزى ئارقىلىق باھالانغان بولۇپ ، سىتوپلازما پېكسىل ئارىسىدىكى سىتوسېلكېل پېكسىلنىڭ نىسبىتىنى مىقدارلاشتۇرغان.تەكشۈرۈش نەتىجىسىدە كۆرسىتىلىشىچە ، 50 μMM ياكى 100 μM KAND 11 بىلەن بىر سائەت داۋالىغاندىن كېيىن ، زىچلىقى كۆرۈنەرلىك تۆۋەنلەپ ، ئايرىم-ئايرىم ھالدا% 0.94 ± 0.74 ياكى% 0.23 ± 0.28 بولغان ، DMSO بىلەن داۋالانغان ھۈجەيرىلەرنىڭ زىچلىقى 1.61 ± 0.34 بولغان. % (رەسىم 7a).بۇ نەتىجىلەر Arabidopsis دىكى كۆزىتىش بىلەن بىردەك بولۇپ ، KAND 11 داۋالاش پوستلاق قەۋىتىدىكى مىكرو قۇتۇبلارنىڭ دېپولىمېرلىشىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ (6b رەسىم).بىز يەنە GAND-ABD ماركىلىق ئاكتىن فىلمېنتى بىلەن BY-2 لىنىيىسىنى تەكشۈردۇق ، ئوخشاش قويۇقلۇقتىكى KAND 11 بىلەن داۋالاشتىن كېيىن ، KAND 11 داۋالاشنىڭ ئاتىنا تومۇرلىرىنى قالايمىقانلاشتۇرۇۋەتكەنلىكىنى بايقىدۇق.50 μM ياكى 100 μM KAND 11 بىلەن 1 سائەت داۋالاشتا ئاتىنا فىلمېننىڭ زىچلىقى ئايرىم-ئايرىم ھالدا% 1.20 ± 0.62 ياكى% 0.61 ± 0.26 كە تۆۋەنلىدى ، ئەمما DMSO دا ئىشلىتىلگەن ھۈجەيرىلەرنىڭ زىچلىقى% 1.69 ± 0.51 بولدى (2-رەسىم).7b).بۇ نەتىجىلەر ئاتىنا فىلمېنتىغا تەسىر كۆرسەتمەيدىغان پروپىزامىد ۋە مىكرو قۇتۇبىغا تەسىر كۆرسەتمەيدىغان ئاكتىن دېپولىمېرلاشتۇرغۇچى لاترونكۇلىن B بىلەن سېلىشتۇرما قىلىدۇ (SI رەسىم S6).ئۇنىڭدىن باشقا ، كۇمامونامىد 1 ، كۇئامونامىد كىسلاتاسى 6 ياكى KAND 11 بىلەن داۋالاش HeLa ھۈجەيرىسىدىكى مىكرو قۇتۇبىغا تەسىر كۆرسەتمىدى (SI رەسىم S7).شۇڭا ، KAND 11 نىڭ ھەرىكەت مېخانىزمى داڭلىق سىتوسكېلېتوننى قالايمىقانلاشتۇرغۇچىلارغا ئوخشىمايدۇ دەپ قارىلىدۇ.بۇنىڭدىن باشقا ، بىزنىڭ KAND 11 بىلەن بىر تەرەپ قىلىنغان BY-2 ھۈجەيرىسىنى مىكروسكوپ ئارقىلىق كۆزىتىشىمىز KAND 11 داۋالاش جەريانىدا ھۈجەيرىلەرنىڭ ئۆلۈش نىسبىتىنىڭ باشلانغانلىقىنى ئاشكارىلىدى ھەمدە KAND 11 داۋالاشتىن 30 مىنۇت ئۆتكەندىن كېيىن ئېۋانىس كۆك رەڭلىك ئۆلۈك ھۈجەيرىلەرنىڭ نىسبىتىنىڭ كۆرۈنەرلىك ئاشمىغانلىقىنى كۆرسەتتى. 90 مىنۇتلۇق داۋالاشتا 50 μM ياكى 100 μM KAND بىلەن ئۆلگەندىن كېيىن ، ئۆلگەن ھۈجەيرىلەرنىڭ سانى ئايرىم-ئايرىم ھالدا% 43.7 ياكى% 80.1 كە يەتتى (7c رەسىم).يىغىپ ئېيتقاندا ، بۇ سانلىق مەلۇماتلار روماندىكى سۈيدۈك كىسلاتاسى تۇغۇندى KAND 11 نىڭ ئۆسۈملۈككە خاس سىتوسېلكېلنى تىزگىنلىگۈچى ئىكەنلىكىنى ، ئىلگىرى نامەلۇم ھەرىكەت مېخانىزمى بارلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.
KAND پوستلاق قەۋىتىدىكى مىكرو قۇتۇب ، ئاكتىن فىلمېنتى ۋە تاماكا BY-2 ھۈجەيرىسىنىڭ ھاياتىي كۈچىگە تەسىر كۆرسىتىدۇ.(a) TagRFP-TUA6 نىڭ ئالدىدا BY-2 ھۈجەيرىسىدىكى پوستلاق قەۋىتىدىكى مىكرو قۇتۇبنى تەسۋىرلەش.KAND 11 (50 μM ياكى 100 μM) ياكى DMSO بىلەن بىر تەرەپ قىلىنغان BY-2 ھۈجەيرىلىرى كونفېرانس مىكروسكوپ ئارقىلىق تەكشۈرۈلدى.مېڭە پوستلاق قەۋىتىنىڭ زىچلىقى 25 مۇستەقىل ھۈجەيرىنىڭ مىكروگرافىيىسىدىن ھېسابلىنىدۇ.ھەرپلەر كۆرۈنەرلىك پەرقلەرنى كۆرسىتىدۇ (Tukey HSD سىنىقى ، p<0.05).كىچىك بالداق = 10 µm.(2) GFP-ABD2 نىڭ ئالدىدا تەسۋىرلەنگەن BY-2 ھۈجەيرىسىدىكى پوستلاق قەۋىتىدىكى ئاكتىن فىلمېنتى.KAND 11 (50 μM ياكى 100 μM) ياكى DMSO بىلەن بىر تەرەپ قىلىنغان BY-2 ھۈجەيرىلىرى كونفېرانس مىكروسكوپ ئارقىلىق تەكشۈرۈلدى.پوستلاق قەۋىتىدىكى ئاكتىن فىلمېنتىنىڭ زىچلىقى 25 مۇستەقىل ھۈجەيرىنىڭ مىكروگرافىيىسىدىن ھېسابلىنىدۇ.ھەرپلەر كۆرۈنەرلىك پەرقلەرنى كۆرسىتىدۇ (Tukey HSD سىنىقى ، p<0.05).كىچىك بالداق = 10 µm.(3) ئېۋانىس كۆك داغ ئارقىلىق ئۆلۈپ كەتكەن BY-2 ھۈجەيرىسىنى كۆزىتىش.KAND 11 (50 μM ياكى 100 μM) ياكى DMSO بىلەن بىر تەرەپ قىلىنغان BY-2 ھۈجەيرىلىرى يورۇق مەيدان مىكروسكوپ ئارقىلىق تەكشۈرۈلدى.n = 3.كىچىك بالداق = 100 µm.
يېڭى تەبىئىي مەھسۇلاتلارنىڭ بايقىلىشى ۋە قوللىنىلىشى كىشىلىك ھاياتنىڭ مېدىتسىنا ۋە دېھقانچىلىق قاتارلىق ھەر قايسى تەرەپلىرىدە كۆرۈنەرلىك ئىلگىرىلەشلەرنى قولغا كەلتۈردى.تەبىئىي بايلىقلاردىن پايدىلىق بىرىكمىلەرگە ئېرىشىش ئۈچۈن تارىخ تەتقىقاتى ئېلىپ بېرىلدى.بولۇپمۇ ، ئاتىنومىنوئىسېتېرنىڭ قان تومۇرغا قارشى ئانتىبىئوتىكقا قارشى تۇرۇش دورىسى سۈپىتىدە پايدىلىق ئىكەنلىكى مەلۇم بولۇپ ، ئۇلار ئاۋېرمېتىن ، ھەر خىل ئىككىلەمچى مېتابولىتلارنى ، يەنى ئىۋېرمېتىن ۋە بىلومىنسىننىڭ قوغۇشۇن بىرىكمىسى ۋە ئۇنىڭ تۇغۇندى ماددىلىرىنى ئىشلەپچىقىرىش ئىقتىدارىغا ئىگە بولغاچقا ، دورىغا قارشى تۇرغۇچى دورا سۈپىتىدە ئىشلىتىلىدۇ.ئوخشاشلا ، ئاتىنومىيومېتسېتتىن ھەر خىل ئۆسۈملۈك يوقىتىش بىرىكمىلىرى بايقالغان ، ئۇلارنىڭ بەزىلىرى ئاللىبۇرۇن سودا خاراكتېرلىك ئىشلىتىلگەن.شۇڭلاشقا ، ھەرىكەتچان بىئولوگىيىلىك پائالىيەتلەر بىلەن تەبىئىي مەھسۇلاتلارنى ئايرىۋېتىش ئۈچۈن ئاكتىنومىيېت مېتابولىتلىرىنى ئانالىز قىلىش ئۈنۈملۈك ئىستراتېگىيىلىك ھېسابلىنىدۇ.بۇ تەتقىقاتتا بىز S. werraensis دىن coumamonamide ناملىق يېڭى بىرىكمىنى بايقىدۇق ۋە ئۇنى مۇۋەپپەقىيەتلىك بىرىكتۈردۇق.ئۇرسون كىسلاتاسى ئۇربېنامىد ۋە ئۇنىڭ تۇغۇندى ماددىلىرىنىڭ بىرىكمە ۋاسىتىسى.ئۇ خاس يىلتىز بۈدرە پەيدا قىلىپ ، ئوتتۇراھال ۋە كۈچلۈك ئوت-چۆپ يوقىتىش ھەرىكىتىنى نامايان قىلىپ ، ئۆسۈملۈك مىكروبولىغا بىۋاسىتە ياكى ۋاسىتىلىك زىيان سالىدۇ.قانداقلا بولمىسۇن ، سۈيدۈك كىسلاتاسىنىڭ ھەرىكەت مىخانىزىمى ھازىرقى مىكروبوبىلنى تىزگىنلىگۈچىلەر بىلەن ئوخشىماسلىقى مۇمكىن ، چۈنكى KAND 11 يەنە ئاكتىننىڭ فىلمېنتىنى قالايمىقانلاشتۇرۇپ ، ھۈجەيرىلەرنىڭ ئۆلۈشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ ، بۇ ئارقىلىق ئۇرموتونىك كىسلاتا ۋە ئۇنىڭ تۇغۇندى ماددىلىرىنىڭ كەڭ دائىرىدىكى سىتوسېلكېل قۇرۇلمىسىغا تەسىر كۆرسىتىدىغان تەڭشەش مېخانىزمىنى ئوتتۇرىغا قويدى..
سۈيدۈك كىسلاتاسىنىڭ تېخىمۇ تەپسىلىي ئالاھىدىلىكى سۈيدۈك كىسلاتاسىنىڭ ھەرىكەت مېخانىزمىنى تېخىمۇ ياخشى چۈشىنىشكە ياردەم بېرىدۇ.بولۇپمۇ كېيىنكى نىشان سۈيدۈك كىسلاتاسىنىڭ تۆۋەنلەپ كەتكەن مىكروبوبىلغا باغلىنىش ئىقتىدارىنى باھالاپ ، سۈيدۈك كىسلاتاسى ۋە ئۇنىڭ تۇغۇندى ماددىلىرىنىڭ بىۋاسىتە مىكرو قۇتۇبىدا ھەرىكەت قىلىدىغان ياكى ھەرىكەتلەنمەيدىغانلىقى ياكى ئۇلارنىڭ ھەرىكىتىنىڭ مىكرو قۇتۇبنىڭ تۇراقسىزلىقىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدىغانلىقىنى ئېنىقلاش.ئۇنىڭدىن باشقا ، مىكروبىلوگلار بىۋاسىتە نىشان بولمىغان ئەھۋالدا ، ئۆسۈملۈك ھۈجەيرىسىدىكى سۈيدۈك كىسلاتاسىنىڭ ھەرىكەت مەيدانى ۋە مولېكۇلا نىشانىنى ئېنىقلاش مۇناسىۋەتلىك بىرىكمىلەرنىڭ خۇسۇسىيىتى ۋە ئوت-چۆپ يوقىتىش ھەرىكىتىنى ياخشىلاشنىڭ مۇمكىنچىلىك ئۇسۇللىرىنى تېخىمۇ چوڭقۇر چۈشىنىشكە ياردەم بېرىدۇ.بىزنىڭ بىئولوگىيىلىك ئاكتىپلىقىمىز سۈيدۈك كىسلاتاسىنىڭ Arabidopsis thaliana ، تاماكا ۋە جىگەر ۋىرۇسى قاتارلىق ئۆسۈملۈكلەرنىڭ ئۆسۈشىدىكى ئۆزگىچە سىتاتسىكسىك ئىقتىدارىنى ئاشكارىلىدى ، ئەمما E. coli ياكى HeLa ھۈجەيرىلىرى تەسىرگە ئۇچرىمىدى.ھايۋانات ھۈجەيرىسىگە زەھەرلىك ياكى ئاز زەھەرلىك ماددىلار ئوچۇق دېھقانچىلىق ئېتىزىدا ئىشلىتىلىدىغان ئۆسۈملۈك دورىسى سۈپىتىدە تەرەققىي قىلدۇرۇلسا ، سۈيدۈك كىسلاتاسى تۇخۇمىنىڭ ئەۋزەللىكى.دەرۋەقە ، مىكرو قۇتۇبلار ئېۋكارىئوتتا كۆپ ئۇچرايدىغان قۇرۇلما بولغاچقا ، ئۇلارنىڭ ئۆسۈملۈكلەرنى تاللىشى چەكلەش ئۆسۈملۈك دورىلىرىنىڭ مۇھىم تەلىپى.مەسىلەن ، پروبۇزامىد ، تۇبۇلىنغا بىۋاسىتە تۇتىشىدىغان ۋە پولىمېرلىشىشنى چەكلەيدىغان مىكروبوبۇل دېپولىمېرلاش دورىسى ، ھايۋانات ھۈجەيرىسىگە بولغان زەھەرلىكلىكى تۆۋەن بولغاچقا ، ئۆسۈملۈك يوقىتىش دورىسى سۈپىتىدە ئىشلىتىلىدۇ.دىسوپرامىدغا سېلىشتۇرغاندا ، مۇناسىۋەتلىك بېنزامىدلارنىڭ ئوخشىمىغان نىشان ئالاھىدىلىكى بار.RH-4032 ياكى بېنزوكسامىد ئۆسۈملۈك مىكروبلوبىدىن باشقا ، ھايۋانات ھۈجەيرىلىرى ياكى ئومومېتسېتلارنىڭ مىكروبىلوگلىرىنىمۇ چەكلەيدۇ ، زالىلامىد فىترو ئوكسىدلىنىشچانلىقى تۆۋەن بولغاچقا ، زەمبۇرۇغ يوقىتىش دورىسى سۈپىتىدە ئىشلىتىلىدۇ.يېڭىدىن بايقالغان ئېيىق ۋە ئۇنىڭ تۇغۇندى مەھسۇلاتلىرى ئۆسۈملۈكلەرگە قارىتا تاللانغان سىتاتسىك زەھىرىنى نامايەن قىلىدۇ ، ئەمما دىققەت قىلىشقا ئەرزىيدىغىنى شۇكى ، يەنىمۇ ئىلگىرىلىگەن ھالدا ئۆزگەرتىش ئۇلارنىڭ نىشانلىق ئالاھىدىلىكىنى ئۆزگەرتىپ ، كېسەللىك پەيدا قىلغۇچى زەمبۇرۇغ ياكى تۇخۇم ھۈجەيرىسىنى كونترول قىلىش ئۈچۈن قوشۇمچە تۇغۇندى بىلەن تەمىنلىشى مۇمكىن.
سۈيدۈك كىسلاتاسى ۋە ئۇنىڭ تەركىبىدىكى ئۆزگىچە ئالاھىدىلىكلەر ئۇلارنىڭ ئۆسۈملۈك دورىلىرى سۈپىتىدە تەرەققىي قىلىشى ۋە تەتقىقات قورالى سۈپىتىدە ئىشلىتىلىشىگە پايدىلىق.سىتوسكېلېتوننىڭ ئۆسۈملۈك ھۈجەيرىسىنىڭ شەكلىنى كونترول قىلىشتىكى ئەھمىيىتى كەڭ ئېتىراپ قىلىنغان.ئىلگىرىكى تەتقىقاتلاردا ئىسپاتلىنىشىچە ، ئۆسۈملۈكلەر مىكرو ئورگانىزىمنىڭ ھەرىكەتچانلىقىنى كونترول قىلىش ئارقىلىق پوستلاق قەۋىتى مىكرو ئورگانىزىمنىڭ مۇرەككەپ مېخانىزىمىنى تەرەققىي قىلدۇرغان.مىكروبىلوگ پائالىيىتىنى تەڭشەشكە مەسئۇل بولغان مولېكۇلالارنىڭ سانى ئېنىقلاندى ، مۇناسىۋەتلىك تەتقىقاتلار ھازىرغىچە داۋاملىشىۋاتىدۇ.بىزنىڭ ھازىرقى ئۆسۈملۈك ھۈجەيرىسىدىكى مىكرو قۇتۇبنىڭ ھەرىكەتچانلىقىغا بولغان چۈشەنچىمىز پوستلاق قەۋىتىدىكى مىكرو قۇتۇب تەشكىللەش مېخانىزىمىنى تولۇق چۈشەندۈرۈپ بېرەلمەيدۇ.مەسىلەن ، گەرچە دىسوپىرامىد ۋە ئورېزالىن ھەر ئىككىلىسى مىكرو قۇتۇبنى سۈمۈرۈۋېتەلەيدۇ ، ئەمما دىسوپرامىد يىلتىزنىڭ ئېغىر دەرىجىدە بۇرمىلىنىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ ، ئەمما ئورىزالىننىڭ تەسىرى بىر قەدەر يېنىك.ئۇنىڭ ئۈستىگە ، مىكروبىلوگنى تۇراقلاشتۇرىدىغان تۇبۇلىندىكى ئۆزگىرىشلەرمۇ يىلتىزنىڭ زەھەرسىزلىنىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ ، ھالبۇكى ، مىكرو قۇتۇبنىڭ ھەرىكەتچانلىقىنىمۇ مۇقىملاشتۇرىدىغان پوكلىتاكېل بولمايدۇ.شۇڭلاشقا ، سۈيدۈك كىسلاتاسىنىڭ مولېكۇلا نىشانىنى تەتقىق قىلىش ۋە ئېنىقلاش ئۆسۈملۈك پوستلاق مىكروبلىرىنى تەڭشەشكە يېڭى چۈشەنچە بېرىشى كېرەك.ئوخشاشلا ، كەلگۈسىدىكى دىسوپرامىد قاتارلىق بۇرمىلانغان ئۆسۈشنى ئىلگىرى سۈرۈشتە ئۈنۈملۈك رول ئوينايدىغان خىمىيىلىك ماددىلار ۋە ئورېزالىن ياكى كۇماموتورىك كىسلاتاغا ئوخشاش ئۈنۈملۈك بولمىغان خىمىيىلىك ماددىلارنى سېلىشتۇرۇش ئۆسۈشنىڭ قانداق بۇرمىلانغانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.
يەنە بىر جەھەتتىن ، مۇداپىئەگە مۇناسىۋەتلىك سىتوسېلكېلنىڭ قايتا تەشكىللىنىشى سۈيدۈك كىسلاتاسىنىڭ سىتاتسىك زەھىرىنى چۈشەندۈرۈشنىڭ يەنە بىر مۇمكىنچىلىكى.كېسەللىك قوزغاتقۇچىنىڭ يۇقۇملىنىشى ياكى ئېلېمېنتنىڭ ئۆسۈملۈك ھۈجەيرىسىگە كىرىشى بەزىدە سىتوسكېلېتوننىڭ بۇزۇلۇشىنى ۋە كېيىنكى ھۈجەيرىلەرنىڭ ئۆلۈشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ 29.مەسىلەن ، oomycete دىن ھاسىل بولغان شىفىرلىق ئوكسىدتىن تاماكا ھۈجەيرىسى ئۆلۈشتىن ئىلگىرى مىكرو مۇسكۇل ۋە ئاكتىن فىلمېننى قالايمىقانلاشتۇرىدىغانلىقى خەۋەر قىلىنغان بولۇپ ، بۇ KAND داۋالاش ئۇسۇلى بىلەن يۈز بەرگەنگە ئوخشاش.سۈيدۈك كىسلاتاسى كەلتۈرۈپ چىقارغان مۇداپىئە ئىنكاسى بىلەن ھۈجەيرە ئىنكاسىنىڭ ئوخشاشلىقى بىزنى ئورتاق ھۈجەيرە جەريانىنى قوزغايدۇ دەپ پەرەز قىلىشقا يېتەكلىدى ، گەرچە سۈيدۈك كىسلاتاسىنىڭ شىفىرلىق ئوكسىدتىن تېز ۋە كۈچلۈك تەسىرى كۆرۈنەرلىك بولسىمۇ.قانداقلا بولمىسۇن ، تەتقىقاتلار شۇنى ئىسپاتلىدىكى ، ئاتىن فىلمېنتىنىڭ قالايمىقانلىشىشى ئۆزلۈكىدىن ھۈجەيرىلەرنىڭ ئۆلۈشىنى ئىلگىرى سۈرىدۇ ، بۇ ھەمىشە مىكروبىلوگنىڭ قالايمىقانلىشىشى بىلەن بىللە بولمايدۇ.بۇنىڭدىن باشقا ، ئۇرون كىسلاتاسى تۇخۇمى پەيدا قىلغانغا ئوخشاش ، كېسەللىك قوزغاتقۇچى ياكى ئېرىتكۈچىنىڭ يىلتىزنىڭ بۇرمىلىنىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدىغانلىقىنى يەنىلا كۆزىتىشكە توغرا كېلىدۇ.شۇڭا ، مۇداپىئە ئىنكاسى بىلەن سىتوسكېلېتوننى باغلايدىغان مولېكۇلا بىلىملىرى ھەل قىلىشقا تېگىشلىك جەلپ قىلىش كۈچىگە ئىگە مەسىلە.سۈيدۈك كىسلاتاسىغا مۇناسىۋەتلىك تۆۋەن مولېكۇلا ئېغىرلىقتىكى بىرىكمىلەر ، شۇنداقلا ئوخشىمىغان قۇۋۋىتى بار بىر قاتار تۇغۇندى ماددىلاردىن پايدىلىنىپ ، ئۇلار نامەلۇم ھۈجەيرە مېخانىزىمىنى نىشانلاش پۇرسىتى بىلەن تەمىنلىشى مۇمكىن.
يىغىپ ئېيتقاندا ، مىكرو ئېلېمېنتنىڭ ھەرىكەتچانلىقىنى تەڭشەيدىغان يېڭى بىرىكمىلەرنى بايقاش ۋە قوللىنىش ئۆسۈملۈك ھۈجەيرىسىنىڭ شەكلىنى بەلگىلەشنىڭ ئاساسى بولغان مۇرەككەپ مولېكۇلا مېخانىزىمىنى ھەل قىلىشنىڭ كۈچلۈك ئۇسۇللىرى بىلەن تەمىنلەيدۇ.بۇ ئارقا كۆرۈنۈشتە ، يېقىندا تەرەققىي قىلغان بىرىكمە سۈيدۈك كىسلاتاسى ، مىكروبوبۇلا ۋە ئاكتىننىڭ فىلمېنتىغا تەسىر كۆرسىتىپ ، ھۈجەيرىلەرنىڭ ئۆلۈشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ ، مىكروبوبۇلنى كونترول قىلىش بىلەن بۇ باشقا مېخانىزملارنىڭ باغلىنىشىنى يېشىش پۇرسىتى بىلەن تەمىنلىشى مۇمكىن.شۇڭا ، ئۇربېنونىك كىسلاتاسىنى ئىشلىتىپ خىمىيىلىك ۋە بىئولوگىيىلىك ئانالىز بىزنىڭ ئۆسۈملۈك سىتوسكېلېتوننى كونترول قىلىدىغان مولېكۇلا تەڭشەش مېخانىزىمىنى چۈشىنىشىمىزگە ياردەم بېرىدۇ.
S. werraensis MK493-CF1 نى 500 مىللىلىتىر ئارىلاشتۇرۇلغان Erlenmeyer پلاستىنكىسىغا 110 مىللىلىتىر ئۇرۇقدان تەركىبىدە% 2 (w / v) گالاكتوزا ،% 2 (w / v) جەۋھەر چاپلىقى ،% 1 (w / v) باكتېرىيە تەركىبى بار. .-سويتون (تېرمو فىشېر ئىلمىي شىركىتى) ،% 0.5 (w / v) كۆممىقوناق جەۋھىرى (KOGOSTCH چەكلىك شىركىتى ، ياپونىيە) ،% 0.2 (w / v) (NH4) 2SO4 ۋە دىئونسىزلانغان سۇدا% 0.2 CaCO3.(تۇغۇتتىن ئىلگىرى pH 7.4).ئۇرۇق مەدەنىيىتى 27 سېلسىيە گرادۇسلۇق ئايلانما تەۋرىنىش (180 rpm) دە 2 كۈن سىڭدۈرۈلدى.قاتتىق دۆلەت ئېچىتىش ئارقىلىق ئىشلەپچىقىرىش.ئۇرۇق مەدەنىيىتى (7 مىللىلېتىر) 500 مىللىلىتىرلىق K-1 پلاستىنكىسىغا 40 گرام ئىشلەپچىقىرىش ۋاسىتىسىنى ئۆز ئىچىگە ئالغان 15 گرام بېسىلغان ئارپا (MUSO چەكلىك شىركىتى ، ياپونىيە) ۋە 25 گرام دېئونسىزلانغان سۇ (pH تەڭشەلمىگەن) دىن تەركىب تاپقان. تۇغۇشتىن ئىلگىرى).).ئېچىتىش 30 سېلسىيە گرادۇسلۇق قاراڭغۇدا 14 كۈن ئېلىپ بېرىلدى.ئېچىتىش ماتېرىيالى 40 مىللىمېتىر / بوتۇلكا EtOH بىلەن ئېلىنغان ۋە مەركەزدىن قاچۇرۇلغان (1500 گرام ، ° C4 ، 10 مىنۇت).مەدەنىيەت خاسىيەتلىك كېمىسى (60 مىللىمېتىر)% 10 MeOH / EtOAc ئارىلاشتۇرۇلغان.ئورگانىك قەۋەت تۆۋەن بېسىم ئاستىدا پارغا ئايلىنىپ ، قالدۇق (59.5 مىللىگىرام) غا ئېرىشىپ ، تەتۈر باسقۇچلۇق ئىستوندا ئاستا-ئاستا يوقىتىش (0-10 مىنۇت: 90%) HPLC نىڭ تەسىرىگە ئۇچرىغان (SHISEIDO CAPCELL PAK C18 UG120 ، 5 mm 10 مىللىمېتىر × ئۇزۇنلۇقى 250 مىللىمېتىر) H2O / CH3CN ، 10-35 مىنۇت: 90% H2O / CH3CN دىن% 70 H2O / CH3CN (گرادېنت) ، 35-45 مىنۇت: 90% H2O / EtOH ، 45-155 مىنۇت: 90% H2O / EtOH دىن 100% EtOH (گىرادۇس) ، 155–200 مىنۇت: 100% EtOH) ئېقىش سۈرئىتى 1.5 مىل / مىن ، كۇمامونامىد (1 ، 36.0 مىللىگىرام) ئاق ئامورفا پاراشوكى سۈپىتىدە ئايرىلدى.
Kumamotoamide (1);1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.93 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 6.76 (dd, J = 4.3, 1.8 Hz 1H), 6.05 (t, J = 3.8 Hz, 1H).), 4.08 (s, 3H);13C-NMR (125 MHz ، CDCl3) δ 161.1 ، 121.0 ، 119.9 ، 112.2 ، 105.0 ، 68.3 ؛ESI-HRMS [M + H] +:
كولۇمبىيە ئۇرۇقى (Col-0) Arabidopsis بىئولوگىيىلىك بايلىق مەركىزى (ABRC) دىن تەتقىقاتقا رۇخسەت قىلىنغان.Col-0 ئۇرۇقى بىزنىڭ تەجرىبىخانا شارائىتىمىزدا تارقىلىپ ساقلىنىپ ، ياۋا تىپتىكى Arabidopsis ئۆسۈملۈكلىرى سۈپىتىدە ئىشلىتىلدى.Arabidopsis ئۇرۇقى% 2 لىك ساخاروزا (فۇجىفىلم ۋاكو ساپ خىمىيىلىك) ،% 0.05 (w / v) 2- (4-مورفولىنو) ئېتانېسۇلفونىك كىسلاتاسى (MES) (يېرىم فوسفىلم ۋاكو ساپ خىمىيىلىك) تەركىبىدىكى يېرىم كۈچلۈك مۇراشىگې ۋە سكوگ ۋاستىسىدە يەر يۈزىدە مىكروبسىزلاندۇرۇلدى ۋە مەدەنىيەتلەشتۈرۈلدى. ).) ۋە 1.5% ئاگار (Fujifilm Wako ساپ خىمىيىلىك) ، pH 5.7 ، 23 سېلسىيە گرادۇس ۋە دائىملىق يورۇقلۇق.Phs1-1 ئۆزگەرتكۈچىنىڭ ئۇرۇقىنى T. Hashimoto (نارا پەن-تېخنىكا ئىنستىتۇتى) تەمىنلىگەن.
جىددىيلەشتۈرۈلگەن SR-1 ئۇرۇقىنى T. Hashimoto (نارا پەن-تېخنىكا ئىنستىتۇتى) تەمىنلىگەن ھەمدە ياۋا تىپتىكى تاماكا ئۆسۈملۈكلىرى سۈپىتىدە ئىشلىتىلگەن.تاماكا ئۇرۇقى يەر يۈزىدە مىكروبسىزلاندۇرۇلۇپ ، ئۈچ كېچە ستېرېلېل سۇغا چىلاپ بىخلىنىشنى ئىلگىرى سۈردى ، ئاندىن% 2 لىك ساخاروزا ،% 0.05 (w / v) MES ۋە% 0.8 گېلان سېغىز (Fujifilm Wako ساپ خىمىيىلىك) بولغان يېرىم كۈچلۈك ئېرىتمىگە قويۇلدى. Murashige.ۋە Skoog ئوتتۇراھال) pH 5.7 ۋە تۇراقلىق نۇر ئاستىدا ° C 23 قا چىققان.
Strain Tak-1 نى T. Kohchi (كيوتو ئۇنىۋېرسىتېتى) تەمىنلىگەن بولۇپ ، جىگەر تەتقىقاتى ئۈچۈن ئۆلچەملىك تەجرىبە بىرلىكى سۈپىتىدە ئىشلىتىلگەن.گېمما مىكروبسىزلاندۇرۇلغان مەدەنىيەتلىك ئۆسۈملۈكلەردىن ئېلىنغان ، ئاندىن گامبورگ B5 ۋاستىسى (فۇجىفىلم ۋاكو ساپ خىمىيىلىك دورا) غا% 1 لىك ساخاروزا ۋە% 0.3 گېلى سېغىز بار ھەمدە ئۇدا 23 سېلسىيە گرادۇسلۇق ئۇدا يورۇتۇلغان.
تاماكا BY-2 ھۈجەيرىسى (Nicotiana tabacum L. cv. ئوچۇق سېرىق 2) س.خاسېزاۋا (توكيو ئۇنىۋېرسىتېتى) تەرىپىدىن تەمىنلەنگەن.BY-2 ھۈجەيرىسى ئۆزگەرتىلگەن لىنسمېيېر ۋە سكوگ ۋاستىسىدە 95 ھەسسە سۇيۇلدۇرۇلدى ۋە ھەر ھەپتىدە 244 دىخلوروفېنوكسىئاسسىك كىسلاتا 32 بىلەن تولۇقلاندى.ھۈجەيرە ئاسما قاراڭغۇدا 27 سېلسىيە گرادۇسلۇق ئايلانما تەۋرىنىشكە ئارىلاشتۇرۇلدى.ھۈجەيرىلەرنى يېڭى ئوتتۇراھالنىڭ 10 ھەسسىسىگە تەڭ يۇيۇپ ، ئوخشاش ۋاسىتە بىلەن ئەسلىگە كەلتۈرۈڭ.BY-2 گېنى يۆتكەلگەن ھۈجەيرە لىنىيىسى مىكروبىلوگ بەلگىسى TagRFP-TUA6 ياكى يېسىۋىلەك موزايكا ۋىرۇسى 35S تارقاتقۇچىنىڭ ئاستىدىكى ئاكتىن فىلمېنت بەلگىسى GFP-ABD2 نى مۇقىم ئىپادىلەيدىغان 33،34،35 تەسۋىرلەنگەن.بۇ كاتەكچە سىزىقلارنى ئەسلىدىكى BY-2 كاتەكچىسىگە ئىشلىتىلگەن پروگراممىلارغا ئوخشاش تەرتىپلەر ئارقىلىق ساقلاپ ۋە ماسقەدەملىگىلى بولىدۇ.
HeLa ھۈجەيرىلىرى دۇلبېككونىڭ ئۆزگەرتىلگەن بۈركۈتنىڭ ۋاستىسى (DMEM) (ھاياتلىق تېخنىكىسى) دا يېتىلدۈرۈلۈپ ،% 10 لىك تۆرەلمە كالا قان زەردابى ، 1.2 U / ml پېنىتسىللىن ۋە% 5 لىك CO2 لىك 37 ° C ئىنكۇباتوردا 1.2 mg / ml لىك سترېپتومسىن بار.
بۇ قوليازمىدا تەسۋىرلەنگەن بارلىق سىناقلار ياپونىيەنىڭ بىئولوگىيىلىك بىخەتەرلىك قائىدىسى ۋە كۆرسەتمىسى بويىچە ئېلىپ بېرىلدى.
بىرىكمە ماددىلار دىمېتىل سۇلفوكسىد (DMSO; Fujifilm Wako Pure Chemical) دا ئېرىتمە ئېرىتمىسى سۈپىتىدە ئېرىتىلگەن ۋە Arabidopsis ، تاماكا ياكى جىگەر ۋىرۇسى ئۈچۈن Gamborg B5 ۋاستىسى ئۈچۈن سۇيۇقلاندۇرۇلغان.يىلتىزنىڭ ئۆسۈشىنى چەكلەش ئۈچۈن ، ھەر بىر تەخسىگە 10 دىن ئارتۇق ئۇرۇق كۆرسىتىلگەن بىرىكمە ياكى DMSO بولغان ئاگار ۋاسىتىسىگە تېرىلدى.ئۇرۇق يېتىشتۈرۈش ئۆيىدە 7 كۈن سىلىندى.كۆچەتلەر سۈرەتكە تارتىلىپ ، يىلتىزىنىڭ ئۇزۇنلۇقى ئۆلچەم قىلىندى.Arabidopsis بىخلىنىش تەكشۈرۈشىدە ، ھەر بىر تەخسىگە 48 تال ئۇرۇق 200 μM بىرىكمە ياكى DMSO بولغان ئاگارغا تېرىلدى.Arabidopsis ئۇرۇقى ئۆسۈش ئۆيىدە ئۆستۈرۈلۈپ ، بىخلانغان كۆچەتلەرنىڭ سانى بىخلىنىپ 7 كۈندىن كېيىن ھېسابلىنىدۇ.تاماكا بىخلىنىش ئۈچۈن ، ھەر بىر تەخسىگە 24 تال ئۇرۇق 200 μM KAND ياكى DMSO بولغان ئاگار ۋاسىتىسىگە تېرىلدى.تاماكا ئۇرۇقى ئۆسۈش ئۆيىدە ئۆستۈرۈلۈپ ، بىخلانغان مايسىلارنىڭ سانى 14 كۈندىن كېيىن ھېسابلىنىدۇ.جىگەر ۋىرۇسىنىڭ ئۆسۈشىنى چەكلەش تەكشۈرۈشى ئۈچۈن ، ھەر بىر تەخسىدىن 9 تۆرەلمە كۆرسىتىلگەن قويۇقلۇق دەرىجىسى KAND ياكى DMSO بولغان ئاگار ۋاستىسىگە چاپلانغان ۋە ئۆسۈش ئۆيىدە 14 كۈن يوشۇرۇنغان.
5 مىللىگىرام / مىللىمېتىر پرودىدىي يود (PI) بىلەن بويالغان مايسىلارنى ئىشلىتىپ ، يىلتىز مېرستېم تەشكىلاتىنى تەسەۋۋۇر قىلىڭ.PI سىگنالى فلۇئورېسسېنسېنلىق مىكروسكوپتا TCS SPE سوقما لازېرلىق سىكانېرلاش مىكروسكوپ (Leica Microsystems) ئارقىلىق كۆزىتىلدى.
يىلتىزنىڭ گىستوخېمىيىلىك داغلىرى β- گلۇكوئورونىدازا (GUS) بىلەن مالامى ۋە بېنفېي 36 تەسۋىرلىگەن كېلىشىمگە ئاساسەن ئېلىپ بېرىلدى.مايسىلار بىر كېچىدىلا% 90 ئاتسېتوندا مۇقىملاشتۇرۇلۇپ ، 0.5 مىللىگىرام / مىللىمېتىر 5-برومو-4-خلورو-3-ئىندولىن- β-d- گلۇكوئورون كىسلاتاسى بىلەن GUS بۇففېردا 1 سائەت داغلىنىپ ، سۇيۇقلاندۇرۇلغان خلورالدېھىد ئېرىتمىسىگە قويۇلدى..
تىك شەكىللىك تەخسىگە ئۆستۈرۈلگەن 7 كۈنلۈك كۆچەتتە يىلتىز بۇلۇڭى ئۆلچەم قىلىنغان.يىلتىزنىڭ بۇلۇڭىنى 6-قەدەمدە تەسۋىرلەنگەندەك تارتىش كۈچى ۋېكتورىنىڭ يۆنىلىشىدىن ئۆلچەڭ.
پوستلاق مىكرو قۇتۇبىنىڭ ئورۇنلاشتۇرۇلۇشى تەسۋىرلەنگەندەك كۆزىتىلدى ، 37-كېلىشىمگە ئازراق ئۆزگەرتىش كىرگۈزۈلدى.تۇبلىنغا قارشى ئانتىتېلا (KMX-1 ، مېرك مىلىپور: MAB3408) ۋە Alexa Fluor 488 بىرىكتۈرۈلگەن چاشقانغا قارشى IgG (تېرمو فىشېر ئىلمىي: A32723) 1: 1000 ۋە 1: 100 لىك ئېرىتىشتە دەسلەپكى ۋە ئىككىلەمچى ئانتىتېلا سۈپىتىدە ئىشلىتىلگەن ، ئايرىم ھالدا.فلۇئورېسسېنسىيە رەسىملىرى TCS SPE سوقما لازېرلىق سىكانېرلاش مىكروسكوپ (Leica Microsystems) ئارقىلىق سېتىۋېلىندى.ئىشلەپچىقارغۇچىلارنىڭ كۆرسەتمىسى بويىچە Z شەكىللىك رەسىملەرنى سېتىۋېلىڭ ۋە ئەڭ چوڭ كۈچلۈكلۈك مۆلچەرىنى ھاسىل قىلىڭ.
HeLa ھۈجەيرىسىنىڭ كۆپىيىشى ئىشلەپچىقارغۇچىنىڭ كۆرسەتمىسى بويىچە Cell Counting Kit 8 (Dojindo) ئارقىلىق ئېلىپ بېرىلدى.
E. coli DH5α نىڭ ئۆسۈشى 600 nm (OD600) سپېكترو فوتومېتىر ئارقىلىق مەدەنىيەتتىكى ھۈجەيرىلەرنىڭ زىچلىقىنى ئۆلچەش ئارقىلىق تەھلىل قىلىنغان.
گېنى يۆتكەلگەن BY-2 ھۈجەيرىسىدىكى Cytoskeletal تەشكىلاتى CSU-X1 سوقما سىكانېرلاش ئۈسكۈنىسى (Yokogawa) ۋە sCMOS كامېراسى (Zyla, Andor Technology) ئورنىتىلغان فلۇئورېسسېنسېنلىق مىكروسكوپ ئارقىلىق كۆزىتىلگەن.Cytoskeletal زىچلىقى رەسىم ئانالىزى ئارقىلىق باھالانغان ، بۇ رەسىم 38،39 تەسۋىرلەنگەندەك ImageJ يۇمشاق دېتالى ئارقىلىق قالايمىقان رەسىمدىكى سىتوپلازما پېكسىلنىڭ سىتوپلازما پېكسىلنىڭ نىسبىتىنى مىقدارلاشتۇرغان.
BY-2 ھۈجەيرىسىدىكى ھۈجەيرىلەرنىڭ ئۆلۈشىنى بايقاش ئۈچۈن ، ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا% 0.05 ئېۋانىس كۆك بىلەن ھۈجەيرە ئاسما ئوكۇلى 10 مىنۇت سىڭدۈرۈلگەن.تاللانغان ئېۋانىسنىڭ ئۆلۈك ھۈجەيرىلەرنىڭ كۆك داغلىنىشى بوياقنىڭ ھاياتىي ھۈجەيرىلەردىن مۇكەممەل پلازما پەردىسى تەرىپىدىن چىقىرىلىشىغا باغلىق.داغلانغان ھۈجەيرىلەر يورۇق مەيدان مىكروسكوپ (BX53 ، Olympus) ئارقىلىق كۆزىتىلدى.
HeLa ھۈجەيرىلىرى DMEM دا ئۆستۈرۈلۈپ ، ° C 37 ۋە% 5 لىك نەملەشتۈرۈلگەن ئىنكۇباتوردا% 10 FBS تولۇقلانغان.ھۈجەيرىلەر 100 μM KAND 11 ، كۇمامىنامىن كىسلاتاسى 6 ، كۇمامونامىد 1 ، 100 ng / ml كوللامىن (Gibco) ، ياكى 100 ng / ml Nocodmaze (Sigma) بىلەن 6 سائەت 37 سېلسىيە گرادۇستا بىر تەرەپ قىلىندى.ھۈجەيرىلەر MetOH بىلەن 10 مىنۇت تۇرغۇزۇلدى ، ئاندىن ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا ئاتسېتات بىلەن 5 مىنۇت تۇرغۇزۇلدى.مۇقىم ھۈجەيرىلەرگە tub- تۇبۇلىن دەسلەپكى ئانتىتېلاسى (1D4A4 ، Proteintech: 66240-1)% 0.5 BSA / PBS دا 2 سائەت سۇيۇلدۇرۇلدى ، TBST بىلەن 3 قېتىم يۇيۇلدى ، ئاندىن Alexa Fluor ئۆچكە ئانتىتېلاسى قوشۇلدى.488 1 سائەت.- چاشقان IgG (تېرمو فىشېر ئىلمىي: A11001) ۋە 15 ng / ml 4 ′ ، 6 دىئامدىنو -2 فېنلىنلىنول (DAPI)% 0.5 BSA / PBS دا سۇيۇلدى.TBST بىلەن ئۈچ قېتىم يۇيۇلغاندىن كېيىن ، Nikon Eclipse Ti-E تەتۈر مىكروسكوپتا داغلانغان ھۈجەيرىلەر بايقالغان.رەسىملەر MetaMorph يۇمشاق دېتالى (مولېكۇلا ئۈسكۈنىلىرى) ئارقىلىق سوۋۇتۇلغان Hamamatsu ORCA-R2 CCD كامېراسى بىلەن تارتىلغان.
يوللانغان ۋاقتى: Jun-17-2024